[發(fā)明專利]一種具有高熱穩(wěn)定性的PET水解酶IsPETase-cSP突變酶及編碼基因及工程菌

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210875888.8
• 申請日: 2022-07-25
• 公開（公告）號: CN116179508A
• 公開（公告）日: 2023-05-30
• 發(fā)明（設計）人: 齊崴;尤生萍;殷慶典;蘇榮欣
• 申請（專利權(quán)）人: 天津大學
• 主分類號: C12N9/18
• 分類號: C12N9/18;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C08J11/10;C08L67/02;C12R1/19
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

1.一種具有高熱穩(wěn)定性的PET水解酶IsPETase-cSP突變酶，命名為IsPETase^S92P/D157A-cSP，其特征在于所述IsPETase^S92P/D157A-cSP的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

2.編碼具有高熱穩(wěn)定性的PET水解酶IsPETase-cSP突變酶的基因，其特征是所述基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

3.含有權(quán)利要求2所述基因的重組質(zhì)粒pET-22b-IsPETase^S92P/D157A-cSP。

4.含有權(quán)利要求3所述重組質(zhì)粒的工程菌BL21(DE3)/pET-22b-IsPETase^S92P/D157A-cSP。

5.權(quán)利要求1的一種具有高熱穩(wěn)定性的PET水解酶IsPETase-cSP突變酶在水解PET中的應用；PET為聚對苯二甲酸乙二醇酯的簡寫。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述應用，其特征是包括如下步驟：

向pH值為8.5～9.5的50mM甘氨酸-NaOH緩沖液中加入PET使終濃度為60～100mg/mL；加入IsPETase^S92P/D157A-cSP使終濃度為400～600nM；在30～45℃，50～220rpm條件下孵育1～3天。