[發(fā)明專利]利用降落式梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗的方法在審

申請?zhí)枺?/td>	202210854782.X	申請日：	2022-07-18
公開（公告）號：	CN115191354A	公開（公告）日：	2022-10-18
發(fā)明（設計）人：	孫文婷;屈艷;袁茹;朱海英;趙文文;趙紅艷;柳芳	申請（專利權）人：	華亭市正元生態(tài)農業(yè)發(fā)展有限公司
主分類號：	A01H4/00	分類號：	A01H4/00
代理公司：	蘭州塞維思知識產權代理事務所(普通合伙) 62208	代理人：	焦海紅
地址：	744100 甘肅省***	國省代碼：	甘肅;62
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摘要：
搜索關鍵詞：	利用降落梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗方法
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【說明書】：

本發(fā)明公開了利用降落式梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗的方法，屬于草莓育苗技術領域，以解決現有方法缺乏考慮繼代培養(yǎng)階段高濃度的激素培養(yǎng)對后期馴化煉苗、種苗培育的影響的問題。方法包括梯度篩選實驗；ms培養(yǎng)基的配置和滅菌；外植體的獲取及滅菌；接種、室內培養(yǎng)及誘導生根；溫室馴化組培苗移栽；本發(fā)明對脫毒草莓組培苗的培養(yǎng)方式采用降落式繼代培養(yǎng)，其優(yōu)勢一方面在于能最大限度的降低植物激素在后期甚至馴化煉苗階段對草莓種苗的調控，更有利于后期的種苗種植。另一方面在于前期的誘導培養(yǎng)階段不需要對所培養(yǎng)的品種進行前期的濃度梯度篩選，能最大限度的節(jié)約時間，降低實驗成本。

技術領域

本發(fā)明屬于草莓育苗技術領域，具體涉及利用降落式梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗的方法。

背景技術

草莓的三級種苗培育體系是原原種苗、原種苗、種苗的培育，決定產業(yè)化種植中種苗性狀、品質的關鍵在于原原種苗的組培上。現有技術中草莓主要的組織培養(yǎng)方式有葉片、花藥、莖尖等。

利用葉片進行組織培養(yǎng)優(yōu)點是取材方便，便于攜帶和保存，但大部分草莓品種的葉片再生率低，只有少數幾個品種成功獲得了簡單、高效的葉片再生芽系統，通用性不高。

花藥組織培養(yǎng)接種容易，從愈傷組織上分化出的不定芽100％不帶病毒，比莖尖分生組織培養(yǎng)獲得無病毒植株的幾率高，但從花藥培養(yǎng)到分化出再生苗需要時間較長，因為花藥培養(yǎng)首先要經過愈傷組織的誘導和再分化過程，然后才能轉人正常的繼代快繁培養(yǎng)過程。

莖尖分生組織培養(yǎng)優(yōu)點是不需要誘導愈傷組織和不定芽分化過程，脫毒效果好，培養(yǎng)時間短，并且在培養(yǎng)中植株的變異率低。缺點是剝取較難，并且在分生組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)材料易感染，消毒難，莖尖培養(yǎng)操作繁瑣。因此，草莓在繁殖脫毒苗選擇外植體主要是莖尖。

為進一步提高草莓脫毒種苗的繁殖速度與質量，以表現優(yōu)異的紅玉、雪里香、天仙醉、雪兔的莖尖為外植體，研究其適宜的誘導培養(yǎng)、叢生芽增殖的培養(yǎng)基。根據多年來對紅玉、雪里香、天仙醉、雪兔四個品種，每個品種6個梯度實驗的誘導率統計，發(fā)現這幾個品種在特定的調控下誘導率較高，而現有草莓脫毒培養(yǎng)繼代培養(yǎng)階段雖采用前期梯度實驗篩選出的最佳濃度，但并未考慮繼代培養(yǎng)階段高濃度的激素培養(yǎng)對后期馴化煉苗、種苗培育的影響。

基于以上背景技術中的內容，研發(fā)人員便在繼代培養(yǎng)階段嘗試采用降落式梯度培養(yǎng)法進行培養(yǎng)。在實踐中得到了顯著效果，提取出了利用降落式梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗的方法，

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供利用降落式梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗的方法，以解決現有方法缺乏考慮繼代培養(yǎng)階段高濃度的激素培養(yǎng)對后期馴化煉苗、種苗培育的影響的問題。

為了解決以上問題，本發(fā)明技術方案為：

利用降落式梯度培養(yǎng)基生產脫毒草莓組培苗的方法，該方法分為以下步驟：

步驟S1、梯度篩選實驗；

步驟S2、ms培養(yǎng)基的配置和滅菌；

S2.1.配置培養(yǎng)基；

ms培養(yǎng)基配置：稱取ms培養(yǎng)基4.43g/L,加入30g/L蔗糖至燒杯中，按照實驗設計量溶于一定量的蒸餾水中；

同時配置生長調節(jié)劑，清理洗滌實驗用具；

S2.2.滅菌；

采用高壓滅菌鍋滅菌；