[發(fā)明專利]一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210834635.6 | 申請(qǐng)日： | 2022-07-14 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN115524410A | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-12-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張永萍;繆艷燕;楊芳芳;劉耀;曹?chē)?guó)瓊;徐劍;楊露;何金英 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 貴州中醫(yī)藥大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào)： | G01N30/02 | 分類(lèi)號(hào)： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14 |
| 代理公司： | 北京聯(lián)創(chuàng)佳為專利事務(wù)所(普通合伙) 11362 | 代理人： | 張梅 |
| 地址： | 550025 貴州省*** | 國(guó)省代碼： | 貴州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 人參 乙醇 提取物 含量 測(cè)定 方法 | ||
本發(fā)明公開(kāi)了一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，該方法可以將血人參乙醇提取物浸膏粉（ISs?EthE）中的兒茶素和表兒茶素有效分離，其中ISs?EthE指標(biāo)成分兒茶素線性范圍為2.04μg·mL?1~32.74μg·mL?1，ISs?EthE指標(biāo)成分表兒茶素的線性范圍為4.50μg·mL?1~71.20μg·mL?1，二者在線性范圍內(nèi)線性良好（R20.99）。另外，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收率等結(jié)果表明，該分析方法穩(wěn)定可行。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，特別是一種血人參乙醇提 取物中兒茶素和表兒茶素含量測(cè)定方法。
背景技術(shù)
血人參(Indigofera stachyodes，ISs)為豆科植物木藍(lán)屬茸毛木藍(lán) (Indigoferaatachyoides Lindl)的干燥根，是苗族民間常用藥，于2003年 被《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》收載，應(yīng)用歷史悠久，其味甘、微苦， 性溫，歸肝、腎、大腸經(jīng)，具有滋陰補(bǔ)虛、調(diào)經(jīng)攝血、活血舒筋的功效，主治崩 漏，主要分布于云南、貴州、福建、廣西等地，尤以貴州貴陽(yáng)、安順、黔西南、 黔東南等地分布廣泛。
目前對(duì)血人參中成分已有大量研究，但對(duì)其乙醇提取物中兒茶素和表兒茶素 含量測(cè)定方法尚未有所報(bào)道，本發(fā)明建立了血人參乙醇提取物浸膏粉(ISs-EthE) 的高效液相分析方法，通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證該分析方法穩(wěn)定可行。。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法。本發(fā)明采用 高效液相分析方法對(duì)血人參乙醇提取物浸膏粉(ISs-EthE)的兒茶素和表兒茶素 化學(xué)成分進(jìn)行含量測(cè)定。
本發(fā)明的技術(shù)方案：
一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，包括有以下步驟：
a、血人參乙醇提取物浸膏粉的制備：稱取血人參藥材適量，剪斷或切碎， 加60％乙醇回流提取，過(guò)濾，濾渣加60％乙醇回流提取，過(guò)濾；合并兩次濾液， 減壓回收乙醇并濃縮至一定濃度，真空干燥至含水量5％，即得血人參乙醇提取 物浸膏粉；
b、供試品的制備：精密稱取血人參乙醇提取物浸膏粉于容量瓶中加入甲醇 超聲使其完全溶解，定容即得；
c、混合對(duì)照品制備：精密稱取兒茶素、表兒茶素分別于容量瓶中，加甲醇 使其完全溶解并定容，作為兒茶素和表兒茶素的儲(chǔ)備液，再精密移取兒茶素儲(chǔ)備 液和表兒茶素儲(chǔ)備液置于容量瓶并用甲醇定容，得到兒茶素和表兒茶素的混合對(duì) 照品儲(chǔ)備液，4℃保存；
d、將供試品溶液和混合對(duì)照品溶液分別在色譜條件下進(jìn)行UPLC測(cè)定，有 效分離血人參乙醇提取物浸膏粉中的兒茶素和表兒茶素，并測(cè)定兒茶素和表兒茶 素的含量；
e、通過(guò)通過(guò)對(duì)其專屬性、線性范圍、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收 率的考察，評(píng)價(jià)該分析方法的可行性。
前述的一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，所述步驟a中，稱取血人參藥 材適量，剪斷或切碎，加5-7倍量60％乙醇回流提取1-3h，過(guò)濾，濾渣加3-5 倍量60％乙醇回流提取1-2h，過(guò)濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇并濃縮至一定 濃度，真空干燥至含水量5％，即得血人參乙醇提取物浸膏粉。
具體的說(shuō)，前述的一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，所述步驟a中，稱 取血人參藥材適量，剪斷或切碎，加6倍量60％乙醇回流提取2h，過(guò)濾，濾渣 加4倍量60％乙醇回流提取1.5h，過(guò)濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇并濃縮 至一定濃度，真空干燥至含水量5％，即得血人參乙醇提取物浸膏粉。
前述的一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，所述步驟b中，供試品的制 備：精密稱取血人參乙醇提取物浸膏粉0.050g于10mL容量瓶中加入甲醇超聲 使其完全溶解，定容至10mL，即得。
具體的說(shuō)，前述的一種血人參乙醇提取物含量測(cè)定方法，所述步驟b中， 超聲頻率為53kHz。
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