[發(fā)明專利]一種血人參乙醇提取物含量測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210834635.6
• 申請日: 2022-07-14
• 公開（公告）號: CN115524410A
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張永萍;繆艷燕;楊芳芳;劉耀;曹國瓊;徐劍;楊露;何金英
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州中醫(yī)藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 北京聯(lián)創(chuàng)佳為專利事務所(普通合伙) 11362
• 代理人: 張梅

1.一種血人參乙醇提取物的含量測定方法，其特征在于：包括有以下步驟：

血人參乙醇提取物浸膏粉的制備：稱取血人參藥材適量，剪斷或切碎，加60%乙醇回流提取，過濾，濾渣加60%乙醇回流提取，過濾；合并兩次濾液，減壓回收乙醇并濃縮至一定濃度，真空干燥至含水量5%，即得血人參乙醇提取物浸膏粉；

供試品的制備：精密稱取血人參乙醇提取物浸膏粉于容量瓶中加入甲醇超聲使其完全溶解，定容即得；

混合對照品制備：精密稱取兒茶素、表兒茶素分別于容量瓶中，加甲醇使其完全溶解并定容，作為兒茶素和表兒茶素的儲備液，再精密移取兒茶素儲備液和表兒茶素儲備液置于容量瓶并用甲醇定容，得到兒茶素和表兒茶素的混合對照品儲備液，4℃保存；

將供試品溶液和混合對照品溶液分別在色譜條件下進行 UPLC測定，有效分離血人參乙醇提取物浸膏粉中的兒茶素和表兒茶素，并測定兒茶素和表兒茶素的含量；

通過通過對其專屬性、線性范圍、精密度、重復性、穩(wěn)定性和加樣回收率的考察，評價該分析方法的可行性。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種血人參乙醇提取物的含量測定方法，其特征在于：所述步驟a中，稱取血人參藥材適量，剪斷或切碎，加5-7倍量60%乙醇回流提取1-3 h，過濾，濾渣加3-5倍量60%乙醇回流提取1-2h，過濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇并濃縮至一定濃度，真空干燥至含水量5%，即得血人參乙醇提取物浸膏粉。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種血人參乙醇提取物的含量測定方法，其特征在于：所述步驟a中，稱取血人參藥材適量，剪斷或切碎，加6倍量60%乙醇回流提取2 h，過濾，濾渣加4倍量60%乙醇回流提取1.5 h，過濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇并濃縮至一定濃度，真空干燥至含水量5%，即得血人參乙醇提取物浸膏粉。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種血人參乙醇提取物的含量測定方法，其特征在于：所述步驟b中，供試品的制備：精密稱取血人參乙醇提取物浸膏粉0.050 g于10 mL容量瓶中加入甲醇超聲使其完全溶解，定容至10 mL，即得。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的一種血人參乙醇提取物含量測定方法，其特征在于：所述步驟b中，超聲頻率為53 kHz 。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種血人參乙醇提取物的含量測定方法，其特征在于：所述步驟c中，混合對照品制備：精密稱取兒茶素0.01635g、表兒茶素0.01424g分別于10mL容量瓶中，加甲醇使其完全溶解并定容至10mL，作為兒茶素和表兒茶素的儲備液，再精密移取2 mL兒茶素儲備液和5 mL表兒茶素儲備液置于100mL容量瓶并用甲醇定容至100mL，得到含32.70μg·mL^-1兒茶素和71.20 μg·mL^-1表兒茶素的混合對照品儲備液，4℃保存。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種血人參乙醇提取物的含量測定方法，其特征在于：所述步驟d中的色譜條件為：

色譜柱ComatexTMC₁₈：250 mm×4.6 mm，5 μm，乙腈作為流動相A， 0.2%磷酸水作為流動相B，硫酸為1.0 mL·min^-1，檢測波長為280 nm，柱溫為30℃，進樣10 μL進行梯度洗脫，梯度洗脫序列：0-40 min，8-14%A。