[發明專利]一種酶解提取制備千金藤素的方法

在審

• 申請號: 202210832188.0
• 申請日: 2022-07-15
• 公開（公告）號: CN115197235A
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 付書清;張林;羅宗昂;徐敏;彭松;陳次瓊
• 申請（專利權）人: 四川健騰藥業有限公司
• 主分類號: C07D491/22
• 分類號: C07D491/22
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種千金藤素的提取制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)材料準備：取山烏龜藥材，粉碎至10～60目，加入藥材重量1～3倍的水浸泡8-30小時；

2)酶解：加入藥材重量0.3％～1.5％混合生物酶酶解1～5小時，所述混合生物酶由纖維素酶和α-淀粉酶組成，二者的質量比為1～5:1；所述酶解在40℃～55℃，pH 5.0～7.0條件下進行；

3)提?。杭尤胨幉闹亓?～10倍的50％～95％甲醇或乙醇回流提取2～3次，每次2～3小時，合并提取液，濃縮后得稠膏；

4)酸溶、堿沉：往稠膏中加入1～4倍稠膏重量的2wt％～10wt％鹽酸或硫酸水溶液，加熱、攪拌、溶散后冷卻至室溫，過濾，得酸性濾液，再用2wt％～15wt％的NaOH溶液或KOH溶液調節pH至9～10，靜置沉淀8-30小時，過濾，得到的固體為千金藤素粗品；

5)重結晶：千金藤素粗品在有機溶劑中重結晶，得千金藤素純品。

2.如權利要求1所述的千金藤素的提取制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)材料準備：取山烏龜藥材，粉碎至30～40目，加入藥材重量1.5～2倍的水浸泡12-24小時；

2)酶解：加入藥材重量0.6％～1％混合生物酶酶解1～3小時，所述混合生物酶由纖維素酶和α-淀粉酶組成，二者的質量比為2～4:1；所述酶解在48℃～52℃，pH 5.8～6.2條件下進行；

3)提取：加入藥材重量5～8倍的70％～90％甲醇或乙醇回流提取2～3次，每次2～3小時，合并提取液，濃縮后得稠膏；

4)酸溶、堿沉：往稠膏中加入2～3倍稠膏重量的5wt％～8wt％鹽酸或硫酸水溶液，加熱、攪拌、溶散后冷卻至室溫，過濾，得酸性濾液，再用5wt％～10wt％的NaOH溶液或KOH溶液調節pH至9～10，靜置沉淀12-20小時，過濾，得到的固體為千金藤素粗品；

5)重結晶：千金藤素粗品在有機溶劑中重結晶，得千金藤素純品。

3.如權利要求2所述的千金藤素的提取制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)材料準備：取山烏龜藥材，粉碎至30～40目，加入藥材重量2倍的水浸泡24小時；

2)酶解：加入藥材重量0.8％混合生物酶酶解3小時，所述混合生物酶由纖維素酶和α-淀粉酶組成，二者的質量比為3:1；所述酶解在49℃～51℃，pH 5.9～6.1條件下進行；

3)提取：加入藥材重量6倍的80％甲醇回流提取2～3次，每次2～3小時，合并提取液，濃縮后得稠膏；

4)酸溶、堿沉：往稠膏中加入3倍稠膏重量的6wt％鹽酸或硫酸水溶液，加熱、攪拌、溶散后冷卻至室溫，過濾，得酸性濾液，再用8wt％的NaOH溶液或KOH溶液調節pH至9～10，靜置沉淀20小時，過濾，得到的固體為千金藤素粗品；

5)重結晶：千金藤素粗品在有機溶劑中重結晶，得千金藤素純品。

4.如權利要求1～3中任一項所述的千金藤素的提取制備方法，其特征在于，所述纖維素酶的酶活單位為10000U/g，所述α-淀粉酶的酶活單位為20000U/g。

5.如權利要求1～3中任一項所述的千金藤素的提取制備方法，其特征在于，其中步驟5)中所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、苯中的任意一種。