[發明專利]一種特征多肽及其應用

在審

• 申請號: 202210830207.6
• 申請日: 2022-07-15
• 公開（公告）號: CN115710308A
• 公開（公告）日: 2023-02-24
• 發明（設計）人: 焦陽;尹雪;林永強;汪冰;崔偉亮;譚樂俊;解盈盈;周倩倩;穆向榮;徐興燕
• 申請（專利權）人: 山東省食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;G01N33/68;G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 濟南知來知識產權代理事務所(普通合伙) 37276
• 代理人: 曹麗

1.一種粗吻海龍、長粗吻海龍和葛氏海鐲魚共有特征多肽，其特征在于，所述特征多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述特征多肽在鑒別粗吻海龍、長粗吻海龍和葛氏海鐲魚中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述鑒別使用質譜法進行，檢測離子對包括：SEQ ID NO.1質荷比為m/z 719.1→329.2的定量離子，質荷比為m/z 719.1→797.4的定性離子。

4.一種粗吻海龍、長粗吻海龍和葛氏海鐲魚的鑒別方法，其特征在于，采用權利要求1所述的特征多肽作為對照品。

5.根據權利要求4所述的鑒別方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)供試品溶液的制備：將預處理的海龍提取液或預處理的海龍粉提取液分別與胰蛋白酶混合，得到混合液，將所述混合液與碳酸氫銨水溶液混合，酶解后過濾，取濾液，得到供試品溶液；

(2)對照品溶液的制備：以權利要求1所述粗吻海龍、長粗吻海龍和葛氏海鐲魚共有特征肽為對照品，分別加水溶解，得到對照品溶液；

(3)檢測分析：利用三重四極桿質譜法進行檢測分析；

所述步驟(1)或(2)之間沒有時間先后順序的限定。

6.根據權利要求5所述的鑒別方法，其特征在于，步驟(1)中，所述預處理的海龍提取液的制備方法包括以下步驟：將海龍粉碎，與水混合后煎煮三次，煎煮時間分別為4h、3h和2h，合并煎煮液，使用碳酸氫銨水溶液進行稀釋，得到預處理的海龍提取液；

所述預處理的海龍粉濾液的制備過程包括以下步驟：將海龍粉與水混合，煎煮1h，過濾，取濾液，得到預處理的海龍粉濾液。

7.根據權利要求5所述的鑒別方法，其特征在于，所述胰蛋白酶以胰蛋白酶水溶液的形式進行添加，所述胰蛋白酶在所述胰蛋白酶水溶液中的質量濃度為1mg/ml。

8.根據權利要求5所述的鑒別方法，其特征在于，所述碳酸氫銨水溶液中碳酸氫銨的質量百分含量為1％；所述酶解的條件為37℃酶解2h。

9.根據權利要求5所述的鑒別方法，其特征在于，所述三重四極桿質譜法以0.1％甲酸乙腈為流動相A，以0.1％甲酸溶液為流動相B，進行梯度洗脫：0～3min，5％A→8％A；流速為每分鐘0.5ml。

10.根據權利要求5或9所述的鑒別方法，其特征在于，所述三重四極桿質譜法采用質譜檢測器，電噴霧正離子模式，進行多反應監測，SEQ ID NO.1選擇質荷比m/z 719.1→329.2的定量離子，m/z719.1→797.4的定性離子作為檢測離子對。