[發(fā)明專利]紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法及適生性基質(zhì)在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210798585.0 | 申請日： | 2022-07-08 |
| 公開（公告）號： | CN115197854A | 公開（公告）日： | 2022-10-18 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 賀圣凌;宋詩穎;趙興麗;周羅娜;羅林麗;林雨蝶 | 申請（專利權(quán)）人： | 貴州省生物技術(shù)研究所（貴州省生物技術(shù)重點實驗室;貴州省馬鈴薯研究所;貴州省食品加工研究所） |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N3/00;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 重慶一葉知秋專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50277 | 代理人： | 劉洪雨 |
| 地址： | 550006 貴*** | 國省代碼： | 貴州;52 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 紅曲 發(fā)酵 夏秋茶 菌種 篩選 方法 生性 基質(zhì) | ||
本發(fā)明公開了一種紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法，包括：菌體的活化：選取適用于食品及保健食品的4株紅曲菌，分別為保藏編號CGMCCNo.3.890的橙色紅曲霉、保藏編號CGMCCNo.3.4629的紫紅曲霉、保藏編號CGMCCNo.3.15746的紅色紅曲霉、保藏編號CGMCCNo.3.7196銹色紅曲霉；孢子懸浮液的制備；菌種的篩選：包括孢子懸浮液的接種、菌體干重的測定以及色價的測定。本紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法，篩選出了最適合發(fā)酵夏秋茶的菌種紅色紅曲霉，紅色紅曲霉能改善夏秋茶的滋味苦澀、香氣低的問題，將益生菌?紅曲菌與夏秋茶結(jié)合，利用生物轉(zhuǎn)化獲得功能性茶，能提高夏秋茶利用率，從而減少資源浪費。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及茶葉發(fā)酵菌種篩選技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法及適生性基質(zhì)。
背景技術(shù)
茶樹體內(nèi)的生理活性物質(zhì)的合成受到溫度和光照的影響,夏秋季節(jié)相比春季溫度高日照時間長，導致夏秋茶多酚、花青素及咖啡堿類物質(zhì)含量較高，氨基酸含量較低，酚氨比變大，故滋味苦澀。
夏秋茶常存在滋味苦澀、香氣低、利用率低下、資源浪費等問題，加之茶青采摘、茶葉加工的機械化程度低，技術(shù)簡單、產(chǎn)量低、成本高，導致其銷價過低，故茶園對于夏秋茶鮮葉少采甚至不采，資源浪費尤為明顯。
紅曲菌是真菌中的一個屬，能產(chǎn)生紅曲色素、莫納可林K和桔霉素等多種代謝產(chǎn)物，故紅曲霉菌具有降膽固醇、降血糖及降血壓等功效。研究表明，大部分紅曲菌都可以產(chǎn)生活性較高的蛋白酶，蛋白酶能將蛋白質(zhì)水解成氨基酸、多肽等小分子化合物。利用紅曲發(fā)酵夏秋茶在國內(nèi)研究尚屬空白，將益生菌-紅曲菌與夏秋茶結(jié)合，利用生物轉(zhuǎn)化，有望獲得功能性茶，同時能提高夏秋茶利用率，從而減少資源浪費。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于，針對夏秋茶常存在滋味苦澀、香氣低、利用率低下、資源浪費的問題，提出了一種紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法及適生性基質(zhì)。
為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法包括：菌體的活化：選取適用于食品及保健食品的4株紅曲菌，分別為保藏編號CGMCC No.3.890的橙色紅曲霉、保藏編號CGMCC No.3.4629的紫紅曲霉、保藏編號CGMCC No.3.15746的紅色紅曲霉、保藏編號CGMCC No.3.7196銹色紅曲霉，采用平板劃線法分別將4株紅曲菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 (PDA)斜面上，置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)7天，挑取較好菌落反復采用平板劃線法將其進行活化；
步驟二：孢子懸浮液的制備：分別從4株活化好的紅曲菌平板中刮取一環(huán)菌體于PDA培養(yǎng)皿中培養(yǎng)7天，用7mm打孔器分別從4株活化好的紅曲菌平板中打三個菌餅于無菌PDA培養(yǎng)皿中，倒置培養(yǎng)5天，再使用30mL無菌水刮洗菌體，過濾于無菌三角瓶中，使用血球計數(shù)板計數(shù)，確保孢子濃度達106cfu/mL；
步驟三：菌種的篩選：包括孢子懸浮液的接種、菌體干重的測定以及色價的測定；孢子懸浮液的接種：分別將4株紅曲菌的孢子懸浮液按2％接種量接入基礎(chǔ)培養(yǎng)液中，于180r/min、28℃搖瓶培養(yǎng)5天，每株紅曲菌做三個平行；菌體干重的測定：使用烘干恒重的定量濾紙過濾發(fā)酵液，濾液用50mL離心管收集備用，濾渣用超純水充分洗滌后置于60℃烘干至恒重，稱重計算前后質(zhì)量差即得菌體干重；色價的測定：參照GB1886.19-2015測定過濾后的發(fā)酵液色價。
其中，步驟三中基礎(chǔ)培養(yǎng)液的制備方法為：分別稱取葡萄糖1g、蛋白胨0.5g 于100mL三角瓶中，加入50mL茶汁，于121℃滅菌15min，冷卻備用。
其中，茶汁的制備方法為：準確稱取夏秋茶5g于茶壺中，2000mL蒸餾水煮沸3分鐘，過濾，稀釋2倍即得備用茶汁。
其中，通過紅曲發(fā)酵夏秋茶菌種篩選方法篩選后，發(fā)現(xiàn)紅色紅曲霉為四株紅曲菌株中對夏秋茶適生性最強的菌株。
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