[發明專利]紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法及適生性基質在審
| 申請號： | 202210798585.0 | 申請日： | 2022-07-08 |
| 公開（公告）號： | CN115197854A | 公開（公告）日： | 2022-10-18 |
| 發明（設計）人： | 賀圣凌;宋詩穎;趙興麗;周羅娜;羅林麗;林雨蝶 | 申請（專利權）人： | 貴州省生物技術研究所（貴州省生物技術重點實驗室;貴州省馬鈴薯研究所;貴州省食品加工研究所） |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N3/00;C12Q1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 重慶一葉知秋專利代理事務所(普通合伙) 50277 | 代理人： | 劉洪雨 |
| 地址： | 550006 貴*** | 國省代碼： | 貴州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 紅曲 發酵 夏秋茶 菌種 篩選 方法 生性 基質 | ||
1.一種紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟一：菌體的活化：選取適用于食品及保健食品的4株紅曲菌，分別為保藏編號CGMCCNo.3.890的橙色紅曲霉、保藏編號CGMCC No.3.4629的紫紅曲霉、保藏編號CGMCCNo.3.15746的紅色紅曲霉、保藏編號CGMCC No.3.7196銹色紅曲霉，采用平板劃線法分別將4株紅曲菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)斜面上，置于28℃培養箱中培養7天，挑取較好菌落反復采用平板劃線法將其進行活化；
步驟二：孢子懸浮液的制備：分別從4株活化好的紅曲菌平板中刮取一環菌體于PDA培養皿中培養7天，用7mm打孔器分別從4株活化好的紅曲菌平板中打三個菌餅于無菌PDA培養皿中，倒置培養5天，再使用30mL無菌水刮洗菌體，過濾于無菌三角瓶中，使用血球計數板計數，確保孢子濃度達106cfu/mL；
步驟三：菌種的篩選：包括孢子懸浮液的接種、菌體干重的測定以及色價的測定；孢子懸浮液的接種：分別將4株紅曲菌的孢子懸浮液按2％接種量接入基礎培養液中，于180r/min、28℃搖瓶培養5天，每株紅曲菌做三個平行；菌體干重的測定：使用烘干恒重的定量濾紙過濾發酵液，濾液用50mL離心管收集備用，濾渣用超純水充分洗滌后置于60℃烘干至恒重，稱重計算前后質量差即得菌體干重；色價的測定：參照GB1886.19-2015測定過濾后的發酵液色價。
2.根據權利要求1所述的紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法，其特征在于，所述步驟三中基礎培養液的制備方法為：分別稱取葡萄糖1g、蛋白胨0.5g于100mL三角瓶中，加入50mL茶汁，于121℃滅菌15min，冷卻備用。
3.根據權利要求2所述的紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法，其特征在于，所述茶汁的制備方法為：準確稱取夏秋茶5g于茶壺中，2000mL蒸餾水煮沸3分鐘，過濾，稀釋2倍即得備用茶汁。
4.根據權利要求1所述的紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法，其特征在于，通過紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法篩選后，發現紅色紅曲霉為四株紅曲菌株中對夏秋茶適生性最強的菌株。
5.根據權利要求4所述的紅曲發酵夏秋茶菌種篩選方法，其特征在于，所述紅色紅曲霉的適生性種子液基質配方為：蔗糖1.141g/50ml、蛋白胨0.712g/50ml、硫酸鎂0.048g/50ml，紅曲菌體重量為0.256g/50ml、色價為1.323u/g。
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