[發明專利]一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌、菌劑及其應用

在審

• 申請號: 202210786616.0
• 申請日: 2022-07-04
• 公開（公告）號: CN115927034A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 郭中信;李達;杜秉海;王茂超;郭婧;李超
• 申請（專利權）人: 山東京青農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/125
• 代理公司: 山東華君知識產權代理有限公司 37300
• 代理人: 武歡歡

本發明提供一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌、菌劑及其應用，屬于微生物技術領域，所述枯草芽孢桿菌，分類命名為枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis，保藏編號為CGMCC?No.24778，保藏日期為2022年4月26日；本申請枯草芽孢桿菌與其它枯草芽孢桿菌相比，對于柑橘潰瘍病具有較強的防治效果，本發明所述枯草芽孢桿菌JQ?K98處理接種潰瘍病病原菌后柑橘離體葉片，潰瘍病的發病率僅為6.25%，對柑橘離體葉片潰瘍病的防治效果達92.86%；本發明所述枯草芽孢桿菌JQ?K98，用于大田防治柑橘潰瘍病，防效達87.84%。

技術領域

本公開涉及微生物技術領域，具體提供一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌、菌劑及其應用。

背景技術

柑橘潰瘍病的表現主要為葉片針頭大小的黃色油浸狀斑點，大部分在葉片背面隨后逐漸擴大為圓形，四周凸起，中間凹陷，形似火山口；在果實上癥狀與葉片類似，在樹枝上的程度較輕，但是無論在何部位，最終都會削弱樹勢，嚴重會導致柑橘早期落葉、落花，樹勢衰退，果實產量減少，品質降低，影響種植戶經濟收入。

柑橘潰瘍病是一種毀滅性的世界檢疫性病害，現已在世界多個國家和地區發生，對柑橘產業造成了極大的經濟損失。

柑橘潰瘍病的發生是以老葉上病斑為傳染源，當溫度和空氣濕度適宜時溢出，通過風雨、昆蟲傳播，經寄主的氣孔和傷口感染柑橘幼嫩組織。因此，常規防治潰瘍病的措施包括防治蟲害、及時清園、剪除病枝病葉等方式，可以減輕或者預防潰瘍病的發生和蔓延，該方法成本高，效果無保障。

柑橘潰瘍病的藥劑防治普遍采用銅制劑，其可降低累積在新葉上的菌源，并減輕后續的感染，但銅制劑的過量使用導致柑橘園紅蜘蛛爆發，果實銅超標，食用易造成肝損傷，且防治效果越來越差。

微生物是生物防治的重要組成部分，某些微生物能夠通過分泌抗生素等次級代謝產物直接抑制病原菌的生長；某些微生物也可以通過分泌鐵載體與病原菌競爭鐵離子，從而間接實現抑制病原菌的生長；某些微生物可以通過誘導植物產生系統抗性增強植物的抗病能力。

但是現有技術中的微生物菌劑，防治柑橘潰瘍病的效果較差。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明提供一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌、菌劑及其應用，實現以下發明目的：

篩選一種防治柑橘潰瘍病效果好的微生物，用于防治柑橘潰瘍病，大田實驗的防效達85%以上；同時可以提高柑橘果實的品質。

為解決上述技術問題，本發明采取以下技術方案：

一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌，所述枯草芽孢桿菌的分類命名為枯草芽孢桿菌 Bacillus?subtilis，保藏編號為CGMCC?No.24778，保藏日期為2022年4月26日。

以下是對上述技術方案的進一步改進：

一種防治柑橘潰瘍病的菌劑，所述菌劑為上述枯草芽孢桿菌的發酵液，所述菌劑中，枯草芽孢桿菌的菌含量為112×10^8?cfu/mL。

所述枯草芽孢桿菌的發酵液的制備方法包括菌株活化、種子液制備、發酵；所述發酵包括一級種子罐培養、二級種子罐培養、發酵罐培養。

所述菌株活化的方法為將枯草芽孢桿菌在LB固體培養基上進行三區劃線，37℃培養24h，得到活化的菌株。

所述種子液制備的方法為從活化的菌株中挑取單菌落接種到150mL種子培養基中，在37℃、200轉/min下，培養14h，得到種子液。