[發明專利]一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌、菌劑及其應用

在審

• 申請號: 202210786616.0
• 申請日: 2022-07-04
• 公開（公告）號: CN115927034A
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 郭中信;李達;杜秉海;王茂超;郭婧;李超
• 申請（專利權）人: 山東京青農業科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/125
• 代理公司: 山東華君知識產權代理有限公司 37300
• 代理人: 武歡歡

1.一種防治柑橘潰瘍病的枯草芽孢桿菌，其特征在于：所述枯草芽孢桿菌，分類命名為枯草芽孢桿菌Bacillus?subtilis，保藏編號為CGMCC?No.24778，保藏日期為2022年4月26日。

2.一種防治柑橘潰瘍病的菌劑，其特征在于：所述菌劑為權利要求1所述枯草芽孢桿菌的發酵液，所述菌劑中，枯草芽孢桿菌的菌含量為112×10^8?cfu/mL。

3.根據權利要求2所述的菌劑，其特征在于：所述枯草芽孢桿菌的發酵液的制備方法包括菌株活化、種子液制備、發酵；所述發酵包括一級種子罐培養、二級種子罐培養、發酵罐培養。

4.根據權利要求3所述的菌劑，其特征在于：所述菌株活化的方法為將枯草芽孢桿菌在LB固體培養基上進行三區劃線，37℃培養24h，得到活化的菌株。

5.根據權利要求4所述的菌劑，其特征在于：所述種子液制備的方法為從活化的菌株中挑取單菌落接種到150mL種子培養基中，在37℃、200轉/min下，培養14h，得到種子液。

6.根據權利要求5所述的菌劑，其特征在于：所述一級種子罐培養的方法為，按照體積比為10%的接種量，將種子液接入一級種子罐的種子培養基，控制溫度為37℃，通風為0.8V/V.m，pH為7.5，轉速為200轉/min，培養時間為12h，得到一級種子培養物；所述二級種子罐培養的方法為，按照10%接種量，將一級種子培養物接種到二級種子罐的種子培養基中，控制溫度為37℃、通風為0.8?V/V.m、pH為7.5、轉速為100轉/min、培養時間為12h，取樣鏡檢菌體處于對數生長期，得到二級種子培養物；所述發酵罐培養，將二級種子培養物轉至發酵罐中培養，控制溫度為37℃，?0-6h的通風量為0.8V/V.m，6h后的通風量調至2V/V.m，pH為7.5，轉速為100轉/min，培養時間為32h。

7.根據權利要求6所述的菌劑，其特征在于：所述種子培養基和發酵罐內的發酵培養基，以質量百分比計，均由以下成分組成：麥芽糊精3%，豆粕粉6.5%，葡萄糖0.3%，七水硫酸鎂0.1%，碳酸鈣0.2%，磷酸氫二鈉0.05%，硫酸錳0.02%，消泡劑0.15%，去離子水補足100%。

8.權利要求2所述菌劑的應用，其特征在于：所述菌劑用于預防和防治柑橘潰瘍病。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于：將菌劑用清水稀釋至0.5億/mL，得到菌劑稀釋液，每畝葉面噴施菌劑稀釋液50L。