[發(fā)明專利]一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210779980.4
• 申請(qǐng)日: 2022-07-04
• 公開（公告）號(hào): CN115029400A
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐邦偉;汪興生;劉洪艷;陳媛媛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽申亞農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): C12P19/08
• 分類號(hào): C12P19/08;C12P19/14;C12P19/18;C08B37/02
• 代理公司: 合肥超通知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 34136
• 代理人: 余紅

1.一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：以蔗糖為底物，在右旋糖酐蔗糖酶發(fā)酵液的存在下先合成高分子量的右旋糖酐，再加入右旋糖酐酶發(fā)酵液，降解高分子量的右旋糖酐得到分子量5000～7500Da的右旋糖酐；

步驟2：通過離心5000轉(zhuǎn)5分鐘，除去菌種，離心液通過大孔樹脂柱得到低分子右旋糖酐，將得到的低分子量的右旋糖酐用純水加熱到35-75℃溶解獲得質(zhì)量濃度20％的右旋糖酐溶液，以過氧化物混合液作為氧化劑，制備獲得氧化型右旋糖酐；

步驟3：在攪拌下向步驟2獲得的氧化型右旋糖酐溶液中同時(shí)滴加質(zhì)量濃度為40-50％的三氯化鐵溶液以及質(zhì)量濃度為20％的磷酸鈉溶液控制pH值，滴加過程中控制體系的pH在3-5，滴加時(shí)間為4h，絡(luò)合溫度為40℃，獲得右旋糖酐鐵，隨后用氫氧化鈉調(diào)節(jié)體系的pH值至10.5-11.5，升溫至75℃反應(yīng)5h以上獲得固化右旋糖酐鐵；

步驟4：將步驟3獲得的反應(yīng)液冷卻至室溫，然后用20000-80000Da的超濾膜除去未反應(yīng)的右旋糖酐和低分子量的右旋糖酐鐵，然后再用100-500Da的超濾膜除去其中的鹽離子，噴霧干燥后獲得純化后的右旋糖酐鐵。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述步驟1的反應(yīng)體系中，蔗糖的濃度為120-200mg/mL，右旋糖酐蔗糖酶發(fā)酵液中右旋糖酐蔗糖酶的濃度為0.2IU/mL，右旋糖酐酶發(fā)酵液中右旋糖酐酶的濃度為0.2IU/mL，反應(yīng)溫度為16-37℃，反應(yīng)時(shí)間為48-72小時(shí)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述步驟1的反應(yīng)置于一個(gè)特制發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐內(nèi)設(shè)置圓筒狀陶瓷半透膜，陶瓷半透膜內(nèi)置有發(fā)酵體系且設(shè)置有攪拌器，陶瓷半透膜與發(fā)酵罐壁之間的環(huán)形空腔內(nèi)置有純水，反應(yīng)15h內(nèi)為發(fā)酵初期，保持陶瓷半透膜內(nèi)外液體的靜壓比為5:1，避免反應(yīng)體系的蔗糖濃度及粘度過低；發(fā)酵二期為15h-20h，勻速降低陶瓷半透膜內(nèi)反應(yīng)體系的靜壓，直至發(fā)酵20h時(shí)，內(nèi)外靜壓比為3:1，菌種發(fā)育進(jìn)入對(duì)數(shù)期，反應(yīng)體系粘度及產(chǎn)物濃度逐漸增加；；發(fā)酵三期為20-30h，勻速降低陶瓷半透膜內(nèi)反應(yīng)體系的靜壓，直至發(fā)酵30h時(shí)，內(nèi)外靜壓比為1:1，此時(shí)為反應(yīng)體系粘度及產(chǎn)物濃度暴增時(shí)期，維持低壓使外側(cè)水得以滲透至反應(yīng)體系中，降低體系濃度；發(fā)酵四期為30-40h，反應(yīng)維持平穩(wěn)，菌種發(fā)育至最高峰，粘度達(dá)到最高峰，適當(dāng)增加陶瓷半透膜外側(cè)靜壓，使至發(fā)酵30h時(shí)，內(nèi)外靜壓比為1:2；發(fā)酵40h-結(jié)束前，降解反應(yīng)占主導(dǎo)，粘度逐漸下降，逐步降低陶瓷半透膜外側(cè)靜壓，使發(fā)酵結(jié)束前內(nèi)外靜壓比為1:1；發(fā)酵結(jié)束后，快速增加陶瓷半透膜內(nèi)反應(yīng)體系靜壓使發(fā)酵結(jié)束前內(nèi)外靜壓比為10:1，并逐步排出陶瓷半透膜外液體，得到相對(duì)粘度低于100的反應(yīng)液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述陶瓷半透膜與發(fā)酵罐壁之間的環(huán)形空腔中純水的溫度維持在16-37℃，保證反應(yīng)體系溫度的穩(wěn)定性。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述步驟2的反應(yīng)體系中，過氧化物的濃度為8％；氧化反應(yīng)過程中體系的pH值控制在8，氧化反應(yīng)溫度為30℃，反應(yīng)時(shí)間為6h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述步驟3中，三氯化鐵溶液以及磷酸鈉溶液均加熱至40℃再滴加至體系中。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種畜禽補(bǔ)鐵用右旋糖酐鐵的雙發(fā)酵制備方法，其特征在于，所述步驟4所得純化后的右旋糖酐鐵的分子量分布≤1.7。