[發明專利]檢測流感病毒H5、H7、H9亞型的引物和探針及其應用、試劑和數字PCR試劑盒在審
| 申請號: | 202210770639.2 | 申請日: | 2022-06-30 |
| 公開(公告)號: | CN114959121A | 公開(公告)日: | 2022-08-30 |
| 發明(設計)人: | 周鑫鑫;田星;王虹軍;陳芝娟;賀賢漢 | 申請(專利權)人: | 杭州博日科技股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 張金銘 |
| 地址: | 310000 浙江省杭州市*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 流感病毒 h5 h7 h9 引物 探針 及其 應用 試劑 數字 pcr 試劑盒 | ||
1.一種檢測流感病毒H5、H7、H9亞型的引物和探針,其特征在于,所述引物包括第一引物對、第二引物對和第三引物對;
所述第一引物對具有如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核酸序列;所述第二引物對具有如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列;所述第三引物對具有如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核酸序列;
所述探針包括第一探針、第二探針和第三探針;
所述第一探針具有如SEQ ID NO.7所示的核酸序列;所述第二探針具有如SEQ ID NO.8所示的核酸序列;所述第三探針具有如SEQ ID NO.9所示的核酸序列。
2.根據權利要求1所述的引物和探針,其特征在于,所述探針的5’端連接有熒光報告基團,3’端連接有熒光淬滅基團。
3.根據權利要求2所述的引物和探針,其特征在于,所述熒光報告基團包括FAM、CY5或HEX;
優選地,所述熒光淬滅基團包括TAMRA、BHQ1或BHQ2。
4.權利要求1-3任一項所述的引物和探針在制備流感病毒H5、H7、H9亞型檢測產品中的應用;
優選地,所述檢測產品包括數字PCR試劑盒。
5.一種試劑,其特征在于,包括權利要求1-3任一項所述的引物和探針。
6.一種數字PCR試劑盒,其特征在于,包括權利要求1-3任一項所述的引物和探針以及數字PCR反應預混液。
7.根據權利要求6所述的數字PCR試劑盒,其特征在于,所述數字PCR反應預混液,包括:Buffer、Mg2+、dNTPs、熱啟動Taq酶和逆轉錄酶。
8.根據權利要求6所述的數字PCR試劑盒,其特征在于,還包括陽性對照品;
所述陽性對照品包括H5亞型H基因片段、H7亞型H基因片段和H9亞型H基因片段。
9.根據權利要求8所述的數字PCR試劑盒,其特征在于,所述陽性對照品為含有H5亞型H基因片段、H7亞型H基因片段和H9亞型H基因片段的重組質粒。
10.根據權利要求6所述的數字PCR試劑盒,其特征在于,還包括陰性對照品;
所述陰性對照品為無核酸酶水。
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