[發明專利]一種優化環介導等溫擴增反應的方法在審
| 申請號： | 202210761203.7 | 申請日： | 2022-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN115029420A | 公開（公告）日： | 2022-09-09 |
| 發明（設計）人： | 崔大祥;李雪玲;田靜;仲禺俊;沈琦;李玥 | 申請（專利權）人： | 國納納米技術研究（河北）有限公司;上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6844 | 分類號： | C12Q1/6844;C12Q1/689;C12R1/42;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海東亞專利商標代理有限公司 31208 | 代理人： | 董梅 |
| 地址： | 051430 河北省石家莊市裕華區高*** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 優化 環介導 等溫 擴增 反應 方法 | ||
1.一種優化環介導等溫擴增反應的方法，其特征在于，通過向環介導等溫擴增反應體系中添加石蠟塊同時避免使用甜菜堿來實現wsg txi 優化，包括如下步驟：
（1）在反應管底部加入反應混合物I；
（2）加入石蠟塊，蓋上管蓋，60℃融化、冷卻，其中，石蠟塊的用量為：在25μL的核酸擴增反應體系中加入石蠟塊融化后的體積為8μl；
（3）加入反應混合物II；
（4）進行等溫擴增反應；
（5）核酸擴增產物檢測：通過電泳檢測、濁度檢測或顯色檢測。
2.根據權利要求1所述的一種利優化環介導等溫擴增反應的方法，其特征在于，所述的石蠟塊的熔點為48-50℃。
3.根據權利要求1所述的一種利優化環介導等溫擴增反應的方法，其特征在于，所述的反應混合物I包括dNTP、外引物F3和B3、內引物FIP和BIP、Bst DNA聚合酶、聚合酶緩沖液、Mg2+和/或MnCl2。
4.根據權利要求1所述的一種利優化環介導等溫擴增反應的方法，其特征在于，所述的反應混合物II包括dNTP、外引物F3和B3、內引物FIP和BIP、Bst DNA聚合酶、聚合酶緩沖液、Mg2+和/或MnCl2。
5.根據權利要求1所述的一種優化環介導等溫擴增反應的方法，其特征在于，所述的反應混合物不包括甜菜堿。
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