[發(fā)明專利]一種肝素鈉的脫色方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210745195.7
• 申請日: 2022-06-29
• 公開（公告）號: CN115028757A
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉榜惠
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇麥德森制藥有限公司
• 主分類號: C08B37/10
• 分類號: C08B37/10
• 代理公司: 淮安市科文知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 32223
• 代理人: 鄒文玉

一種肝素鈉的脫色方法，包括步驟：S1：案體積比向小腸粘膜溶液中加入0.1%～0.5%的焦亞硫酸鈉，攪拌0.5～2小時，得到混合液一；S2：將混合液一的PH值調(diào)至8～9，再在溶液中加入蛋白酶，酶解3～6小時；S3：再向小腸酶解液中加入0.1～0.5%的氯化鈣，攪拌使氯化鈉固體溶解；升溫至80～95℃，恒溫絮凝0.5小時；S4：將得到的混合物進(jìn)行過濾，收集濾液，并在濾液中加入樹脂吸附、洗脫、沉淀得到粗品肝素鈉；S5：將所述粗品肝素鈉溶解，在粗品肝素鈉溶液中加入0.1%～0.5%的氧化劑進(jìn)行脫色精制，得到精品肝素鈉。應(yīng)用本發(fā)明的方法從粗品肝素鈉生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行控制，使精制過程中氧化劑的使用量降低70%以上；減少對產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的破壞、收率高，活性高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及肝素鈉純化方法技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種肝素鈉的脫色方法。

背景技術(shù)

肝素鈉是臨床上使用最多、最廣泛的抗凝劑，它也存在于動物的肺、血管壁、腸粘膜等組織中，是動物體內(nèi)一種天然抗凝血物質(zhì)，在生物體內(nèi)與蛋白的復(fù)合物形式出現(xiàn)。常見的肝素鈉脫色方式主要是對粗品肝素鈉進(jìn)行氧化脫色，由于粗品肝素鈉提取過程沒有對色澤加以控制，粗品肝素中含有大量的有色雜質(zhì)，呈較深的顏色。

目前國內(nèi)肝素鈉的生產(chǎn)原料主要為豬小腸，肝素鈉的顏色產(chǎn)生與提取過程原料的保鮮度以及復(fù)雜的反應(yīng)產(chǎn)物有關(guān)，原料不新鮮、不及時抑制生物組織中氧化酶的活性，不但原料產(chǎn)生褐變，還能影響肝素活性。提取過程中的55～95℃高溫處理，原料中大量的蛋白質(zhì)、氨基酸可能發(fā)生復(fù)雜的美拉德反應(yīng)，使得溶液顏色變深。以上因素導(dǎo)致粗品肝素鈉在精制過程中直接脫色的步驟，如普遍采用的高錳酸鉀氧化、雙氧水氧化或是兩者聯(lián)用的方式，氧化劑的使用量較大，對肝素鈉的結(jié)構(gòu)形成了破壞，降低了產(chǎn)品的品質(zhì)與收率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提出了一種肝素鈉的脫色方法，從粗品肝素鈉生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行控制，使精制過程中氧化劑的使用量降低70%以上；減少對產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的破壞、收率高，活性高；能有效的解決上述技術(shù)問題。

本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)：

一種肝素鈉的脫色方法，包括步驟：

S1：向小腸粘膜溶液中加入小腸粘膜溶液體積0.1%～0.5%的焦亞硫酸鈉，攪拌0.5～2小時，得混合液一；

S2：在步驟S1得到的混合液一中加入小腸粘膜重量0.5%的蛋白酶，并將PH值調(diào)至8～9后，酶解3～6小時，得小腸酶解液；

S3：再向小腸酶解液中加入小腸酶解液體積0.1～0.5%的氯化鈣，攪拌使氯化鈣固體溶解；升溫至80～95℃，保溫絮凝0.5小時；

S4：對絮凝后的酶解液用80～100目的濾網(wǎng)進(jìn)行過濾，收集濾液，并在濾液中加入樹脂進(jìn)行吸附、洗脫、沉淀得到粗品肝素鈉；

S5：將所述粗品肝素鈉溶解成4～5%的溶液，在粗品肝素鈉溶液中按體積加入0.1%～0.5%的雙氧水，pH8～9,25～30℃,進(jìn)行脫色8～12h,精制得到精品肝素鈉。

進(jìn)一步的，S1所述的小腸粘膜溶液的制作方式為：向新鮮的豬小腸粘膜中加入其重量4～5倍的水；在加水的過程中，按小腸粘膜溶液的體積加入0.1%～0.5%的焦亞硫酸鈉，攪拌0.5～2小時，將豬小腸粘膜和焦亞硫酸鈉進(jìn)行分散溶解；并在加水?dāng)嚢璧倪^程中升溫，升溫至50～60℃，保溫20～30min。

進(jìn)一步的，S2所述的加入蛋白酶時，需要將小腸粘膜溶液的溫度保溫在40～45℃，并保溫酶解3～6小時；酶解結(jié)束后，向小腸酶解液中按體積加入0.1～0.5%的氯化鈣，攪拌使氯化鈣固體溶解；升溫至80～95℃，保溫絮凝0.5小時。

進(jìn)一步的，所述的蛋白酶采用的是2709堿性蛋白酶。

進(jìn)一步的，S4所述的在濾液中加入樹脂進(jìn)行吸附、洗脫、沉淀得到粗品肝素鈉的操作方式為：

S41：將過濾后得到的濾液降溫至40～60℃，再在濾液中按20～50克樹脂/每公斤黏膜加入陰離子樹脂進(jìn)行吸附，吸附時間達(dá)到8小時以上；