[發(fā)明專利]含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請日: 2022-06-27
• 公開（公告）號: CN115124606A
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋洪東;管驍;黃凱;傅秋云
• 申請（專利權(quán)）人: 上海理工大學(xué)
• 主分類號: C07K14/415
• 分類號: C07K14/415;C12N15/29;C12P21/06;C07K1/14;C07K1/20;A23L33/18;A61K38/16;A61P3/04;A61P3/10
• 代理公司: 上?？剖⒅R產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 褚明偉

1.含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽，其特征在于，為促進(jìn)腸道PYY分泌的生物活性肽，選自以下7種生物活性肽中的一種或幾種：

QPQQPF，氨基酸序列為Gln-Pro-Gln-Gln-Pro-Phe；

PQQPQPF，氨基酸序列為Pro-Gln-Gln-Pro-Gln-Pro-Phe；

LPQQPFPV，氨基酸序列為Leu-Pro-Gln-Gln-Pro-Phe-Pro-Val；

QPFPQQPQ，氨基酸序列為Gln-Pro-Phe-Pro-Gln-Gln-Pro-Gln；

PQQPFLQPL，氨基酸序列為Pro-Gln-Gln-Pro-Phe-Leu-Gln-Pro-Leu；

QPQPYPQQP，氨基酸序列為Gln-Pro-Gln-Pro-Tyr-Pro-Gln-Gln-Pro；

PQQPQQPFFQP，氨基酸序列為Pro-Gln-Gln-Pro-Gln-Gln-Pro-Phe-Phe-Gln-Pro。

2.編碼權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的多核苷酸。

3.權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的制備方法，其特征在于，通過基因工程的方法人工合成，或從大麥蛋白中通過分離純化的方法直接獲得，或直接通過化學(xué)合成制備。

4.含有權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的酶解產(chǎn)物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：用胃蛋白酶和胰蛋白酶依次酶解大麥蛋白，得到大麥蛋白酶解產(chǎn)物，即為含有權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的酶解產(chǎn)物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，從大麥中提取大麥蛋白的方法包括以下步驟：

將大麥磨粉、脫脂，然后加入蒸餾水中，將pH調(diào)到4-6，用纖維素酶預(yù)先處理0.5-2h；然后將pH調(diào)至10-12進(jìn)行蛋白提取，結(jié)束后離心取上清液，將上清液pH調(diào)至4.4-4.6，靜置后離心，水洗；最后干燥得到大麥蛋白。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述胃蛋白酶或胰蛋白酶與所述大麥蛋白的質(zhì)量比為1：10-100；

所述胃蛋白酶或胰蛋白酶的酶解條件為37℃酶解1-4h。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于，得到大麥蛋白酶解產(chǎn)物后，還包括以下步驟：

將所述大麥蛋白酶解產(chǎn)物利用Toyopearl HW-40F尺寸排阻色譜柱進(jìn)行分離，以去離子水作為洗脫劑，以一定的流速進(jìn)行洗脫、層析純化，收集不同組分；然后檢測不同組分對腸內(nèi)分泌細(xì)胞PYY分泌的影響，選取促進(jìn)PYY分泌最高活性的組分為目的組分，即為含有所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的酶解產(chǎn)物。

8.基于權(quán)利要求4-7中任一項(xiàng)所述制備方法制備的含有權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的酶解產(chǎn)物。

9.權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽、含有權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的酶解產(chǎn)物在制備具有如下1)-5)中至少一種功能的產(chǎn)品中的應(yīng)用：

1)促進(jìn)PYY分泌；

2)減緩胃排空；

3)抑制食欲減少進(jìn)食量；

4)預(yù)防或輔助治療肥胖；

5)改善或輔助治療糖尿病。

10.一種產(chǎn)品，其特征在于，其中包含權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽，或含有權(quán)利要求1所述含有氨基酸結(jié)構(gòu)PQQP的寡肽的酶解產(chǎn)物，所述產(chǎn)品具有如下1)-5)中至少一種功能：

1)促進(jìn)PYY分泌；

2)減緩胃排空；

3)抑制食欲減少進(jìn)食量；

4)預(yù)防或輔助治療肥胖；

5)改善或輔助治療糖尿病。