[發明專利]一種促內源性牙髓再生注劑、制法及BMP7在制備牙髓再生注劑中的應用

在審

• 申請號: 202210733680.2
• 申請日: 2022-06-24
• 公開（公告）號: CN115137878A
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 田衛東;梁成;廖立;湯穎峰;張靜怡
• 申請（專利權）人: 成都世聯康健生物科技有限公司
• 主分類號: A61L27/26
• 分類號: A61L27/26;A61L27/50;A61L27/54
• 代理公司: 北京潤澤恒知識產權代理有限公司 11319
• 代理人: 王婷婷

本發明提供一種促內源性牙髓再生注劑、制法及BMP7在制備牙髓再生注劑中的應用，通過膠原凝膠搭載BMP7細胞因子，誘導根尖部的靜止干細胞向根管內部遷移，再生缺失的牙髓組織。其中，BMP7細胞因子通過誘導內源性干細胞歸巢和牙向分化觸發牙髓組織再生，并且作為促血管生成因子介導再生牙髓組織中的血管形成，而膠原凝膠提供了良好的再生微環境，支持干細胞的粘附，伸展，自我更新。相較于細胞移植，注劑具有更可靠的安全性和經濟性。此外，本發明提供的含BMP7注劑用于因牙髓部分或全部壞死導致的牙髓喪失臨床問題，能夠有效簡化基于細胞移植策略的牙髓再生治療步驟，促進內源性的牙髓組織再生，減少病患痛苦。

技術領域

本發明涉及生物醫學技術領域，具體涉及一種促內源性牙髓再生注劑、制法及BMP7在制備牙髓再生注劑中的應用。

背景技術

牙髓通過根尖開口和根管側方交通與牙齒周圍的組織建立聯系，其中含有豐富的細胞、血管和神經，發揮著重要的生理功能。然而，嚴重的齲病或者牙外傷會導致牙髓組織發生壞死，影響了患者的身心健康。

針對這個問題，目前臨床上的處理方法主要包括根管治療、活髓切斷和牙髓血運重建。根管治療術通過器械和藥物清理和消毒根管，最終利用牙膠等材料封閉整個根管系統?；钏枨袛嘈g主要是利用生物材料覆蓋根方活髓，使牙根繼續發育。牙髓血運重建術主要是使根管腔內充滿新鮮血液，誘導機體產生修復反應使牙根繼續生長。

目前，研究人員希望通過利用組織工程的方法在根管腔內再生出具有生理性牙髓結構和恢復牙髓生理功能，這個過程可以依賴于內源性，或外源性干細胞的再生能力。牙髓組織干細胞(Dental pulp stem cells,DPSCs)是在牙髓中發現的具有增殖、遷移、多向分化能力的干細胞。在牙髓組織工程中，DPSCs作為種子細胞已經得到了廣泛研究與應用。

然而，然而基于細胞移植的牙髓再生策略需要在體外對干細胞進行擴增、儲存、運輸、移植等操作程序，這些環節增加了細胞移植的風險，并且，基于細胞移植的牙髓再生策略近年來由于倫理、政策、安全性等問題在臨床轉化應用上受到一定限制?；趦仍葱匝浪柙偕姆椒ㄔ谝欢ǔ潭壬蠟檠浪鑹乃赖幕颊咛峁┝艘环N新的治療策略，具有巨大的應用前景。

迄今為止，臨床上尚無可用于內源性牙髓再生的有效治療策略。

發明內容

針對現有技術中存在的上述問題，本發明提供一種基于搭載BMP7因子膠原凝膠的干細胞歸巢策略，通過膠原凝膠搭載的BMP7細胞因子，誘導體內的靜止干細胞向組織缺失部位遷移、增殖、分化，避免了細胞移植所面臨的一系列的問題，具有更可靠的安全性和經濟性。此外，本發明提供的含BMP7注劑用于促內源性牙髓組織再生，能夠有效簡化基于細胞移植策略的牙髓再生治療步驟，減少病患痛苦。

具體發明內容如下：

第一方面，本發明提供一種促內源性牙髓再生注劑，所述注劑的組成包括BMP7細胞因子和膠原凝膠；所述注劑注射于根管腔內，在體溫條件下轉化為凝膠態支架結構；

所述BMP7細胞因子用于誘導內源性干細胞歸巢和牙向分化觸發牙髓組織再生；

所述膠原凝膠用于支持內源性干細胞的粘附，伸展，自我更新。

可選地，所述BMP7細胞因子和所述膠原凝膠的質量體積比為10-250ng：1mL。

可選地，所述注劑的保存和注射溫度為0-4℃。

第二方面，本發明提供一種上述第一方面所述的促內源性牙髓再生注劑的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：

S1：將膠原凝膠溶液、5 x DMEM溶液以及緩沖溶液在0-4℃條件下混合，形成混合溶液Ⅰ；

S2、將BMP7細胞因子粉末溶解于含4mM HCl和0.1％的牛血清蛋白的無菌純水中，形成混合溶液Ⅱ；