[發明專利]一種用于全血過濾的功能化載體及其制備方法

在審

• 申請號: 202210717813.7
• 申請日: 2022-06-23
• 公開（公告）號: CN114908048A
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 李勇;陳曄洲;吳斐然;段生寶;王紅梅;丁少華;杜子謙;黃奕芝
• 申請（專利權）人: 季華實驗室
• 主分類號: C12N5/078
• 分類號: C12N5/078;G01N33/531;G01N33/543
• 代理公司: 佛山市海融科創知識產權代理事務所(普通合伙) 44377
• 代理人: 羅尹清

本申請涉及免疫檢測領域，公開了一種用于全血過濾的功能化載體及其制備方法，包括以下步驟：取蠶繭，清洗浸泡，水浴處理，脫膠處理；對脫膠后的蠶繭進行打漿，過濾，干燥，得蠶絲絕干漿；取生絲，清洗浸泡，裁剪成短纖維生絲；取所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿制成蠶絲生絲混合漿；使用紙頁成型機得半成品蠶絲膜；在真空、高溫條件下抄造成蠶絲膜。在本申請方案中，采用生絲與蠶絲絕干漿為功能化載體的主要原料，功能化載體是以生絲為骨架，其間孔隙填充蠶絲絕干漿的復合結構，呈多層孔隙結構，與抗紅細胞抗體結合的比表面積大，能結合更多的抗紅細胞抗體，從而顯著提高紅細胞的截留效率。

技術領域

本申請涉及免疫檢測領域，主要涉及一種用于全血過濾的功能化載體及其制備方法。

背景技術

血清或血漿樣本是免疫檢測最常見的檢測對象。目前，對全血樣本的處理有離心獲取血漿的方法，或者，放置一段時間等全血凝固取血清的方法，但是這些方法都比較耗時，而且離心需要離心機和電力，因此離心或凝固的方法不適用于即時檢驗(POCT)的應用場景中，由于時間的緊迫性，需要能簡便快速地從全血中分離血清或血漿的裝置和方法，增強POCT產品及時性的優點。

免疫側向層析診斷技術作為一種穩定和實用的技術，適合在多樣的POCT現場使用。目前在免疫側向層析診斷技術中通常都是直接采用全血作為檢測樣本，并在樣品墊處做過濾紅細胞的處理。樣品墊濾除紅細胞的常見方式有兩種：一是用物理過濾的方法，用特定孔徑大小的全血濾膜或者柱狀排列裝置來過濾全血樣本，使紅細胞和其他雜質被截留，而血漿能通過濾膜或裝置進入反應區；二是在樣品墊處加抗紅細胞抗體，通過抗原抗體反應使紅細胞凝集并被捕獲在樣品墊上，而血漿與抗紅細胞抗體不發生反應則能順利通過，從而達到分離的目的。

但是以上兩種樣品墊濾除紅細胞的方法都有一些不足之處，物理過濾的方法由于全血濾膜孔徑小，容易被堵住，特別是在主動式液體流動的狀態下，即給液體一定的動力驅動，濾膜或裝置會由于驅動力擠壓紅細胞的作用，紅細胞堵住濾膜或裝置，阻斷液體驅動力，使液體無法按預想的方式流動，另外，壓力過大時甚至可能使紅細胞破裂，從而影響試驗結果。在加抗紅細胞抗體的方法中，由于抗紅細胞抗體是采用物理吸附的方式固定到樣品墊（通常是聚酯纖維或玻璃纖維材料）上，吸附能力有限，而且抗體與樣品墊的結合是無序結合，其暴露的有效結合位點有限，因此對紅細胞的捕獲能力也有限，容易有紅細胞擴散到反應區，影響結果判讀。

因此，現有技術還有待于改進和發展。

發明內容

鑒于上述現有技術的不足，本申請的目的在于提供一種用于全血過濾的功能化載體及其制備方法，旨在解決現有加抗紅細胞抗體的樣品墊對紅細胞的捕獲能力有限的問題。

本申請的技術方案如下：

一種用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其中，包括以下步驟：

（1）取蠶繭，清洗浸泡，水浴處理；

（2）在高壓40-50psi、高溫120-130℃下，對蠶繭進行脫膠處理；

（3）對脫膠后的蠶繭進行打漿，過濾，干燥，得蠶絲絕干漿；

（4）取生絲，清洗浸泡，裁剪成短纖維生絲；

（5）取所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿，加入水和分散劑，混勻成蠶絲生絲混合漿；

（6）在所述蠶絲生絲混合漿中加水，使用紙頁成型機制得半成品蠶絲膜；

（7）在真空、高溫條件下抄造成蠶絲膜；

（8）將所述蠶絲膜裁剪成小片，加入酪蛋白溶液中，50-60℃水浴浸泡所述蠶絲膜1-3h，用真空干燥機真空除氣泡至少一次，再次50-60℃水浴1-3h，洗滌備用。

所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其中，所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿的質量比為2:1。

所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其中，步驟（7）中，所述抄造的條件為壓力1psi~6psi，溫度100~130℃，時間5min~10min。