[發(fā)明專利]一種用于全血過濾的功能化載體及其制備方法

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• 申請日: 2022-06-23
• 公開（公告）號: CN114908048A
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李勇;陳曄洲;吳斐然;段生寶;王紅梅;丁少華;杜子謙;黃奕芝
• 申請（專利權(quán)）人: 季華實驗室
• 主分類號: C12N5/078
• 分類號: C12N5/078;G01N33/531;G01N33/543
• 代理公司: 佛山市海融科創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44377
• 代理人: 羅尹清

1.一種用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）取蠶繭，清洗浸泡，水浴處理；

（2）在高壓40-50psi、高溫120-130℃下，對蠶繭進行脫膠處理；

（3）對脫膠后的蠶繭進行打漿，過濾，干燥，得蠶絲絕干漿；

（4）取生絲，清洗浸泡，裁剪成短纖維生絲；

（5）取所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿，加入水和分散劑，混勻成蠶絲生絲混合漿；

（6）在所述蠶絲生絲混合漿中加水，使用紙頁成型機制得半成品蠶絲膜；

（7）在真空、高溫條件下抄造成蠶絲膜；

（8）將所述蠶絲膜裁剪成小片，加入酪蛋白溶液中，50-60℃水浴浸泡所述蠶絲膜1-3h，用真空干燥機真空除氣泡至少一次，再次50-60℃水浴1-3h，洗滌備用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿的質(zhì)量比為2:1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，步驟（7）中，所述抄造的條件為壓力1psi~6psi，溫度100~130℃，時間5min~10min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，所述清洗浸泡過程為用水清洗浸泡0.5~3h，所述水浴處理為70~100℃水浴1~3h；

步驟（2）中，所述脫膠處理的時間為0.5-1h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述打漿過程中，刀片負重4.3kg~9.8kg，打漿時間1200-2400s，打漿度10°SR -20°SR；

在步驟（3）中，所述過濾為采用100目篩進行過濾。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，步驟（4）中，所述清洗浸泡過程為用水清洗浸泡0.5~1h，所述裁剪過程為將所述生絲裁剪至長度為0.2-0.5cm的所述短纖維生絲；

在步驟（5）中，所述分散劑為羥乙基纖維素、拉米夫定中間體、聚氧化乙烯中的一種或兩種以上的混合物；所述分散劑的添加量為所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿的總重量的0.5%~1%；

在步驟（6）中，每1L所述蠶絲生絲混合漿加4~6L所述水。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，在步驟（5）中，所述短纖維生絲與所述蠶絲絕干漿的總重量占所述蠶絲生絲混合漿重量的0.5%。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，在步驟（8）之后還包括以下步驟：

在蠶絲膜上偶聯(lián)特異性抗蠶絲膜抗體；

偶聯(lián)交聯(lián)抗體；

偶聯(lián)抗紅細胞抗體；

20~25℃室溫晾干。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法，其特征在于，所述在蠶絲膜上偶聯(lián)特異性抗蠶絲膜抗體的過程為在所述蠶絲膜中加入終濃度15~25μg/mL的特異性抗蠶絲膜抗體，1~5℃孵育過夜；

所述偶聯(lián)交聯(lián)抗體的過程為將所述蠶絲膜洗滌至少2次，再向所述蠶絲膜中加入交聯(lián)抗體，交聯(lián)抗體的終濃度為10~25μg/mL，室溫振蕩反應1~3小時，1~5℃孵育過夜；

所述偶聯(lián)抗紅細胞抗體的過程為將所述蠶絲膜洗滌至少2次，再向所述蠶絲膜中加入終濃度為5~25μg/mL的抗紅細胞抗體，1~5℃孵育過夜。

10.一種用于全血過濾的功能化載體，其特征在于，采用如權(quán)利要求1~9任一項所述的用于全血過濾的功能化載體的制備方法制備得到。