[發明專利]恒溫環型核酸擴增法引物組及以其擴增核酸的方法

在審

• 申請號: 202210673420.0
• 申請日: 2022-06-14
• 公開（公告）號: CN115537455A
• 公開（公告）日: 2022-12-30
• 發明（設計）人: 施奉英
• 申請（專利權）人: 臺達電子國際（新加坡）私人有限公司
• 主分類號: C12Q1/6848
• 分類號: C12Q1/6848;C12N15/11
• 代理公司: 隆天知識產權代理有限公司 72003
• 代理人: 向勇

1.一種恒溫環型核酸擴增法(LAMP)引物組，包括FIP、BIP、F3、與B3之原始LAMP引物，以及至少一自主引物：

其中這些原始LAMP引物靶向核酸上的區域F3、F2、F1C、B1C、B2、及B3，且區域F3、F2、F1、B1C、B2C、及B3C在該核酸之一順向鏈的5’端往3’端依序排列；

其中該引物FIP包括靶向該區域F1C及該區域F2的寡核苷酸，且該引物BIP包括靶向該區域B1C及該區域B2的寡核苷酸；以及

其中該至少一自主引物靶向的一區域位在從F3到B3的區域之外。

2.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該核酸為DNA、RNA、或其組合。

3.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該至少一自主引物靶向的該區域位在該區域F3的上游或該區域B3的上游。

4.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該至少一自主引物包括至少一對自主引物，分別靶向區域F4及區域B4，該區域F4位在該區域F3的上游，且該區域B4位在該區域B3的上游。

5.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該至少一自主引物包括兩對自主引物，分別靶向區域F4、B4、F5、及B5，該區域F5位在該區域F4的上游，該區域F4位在該區域F3的上游，該區域B5位在該區域B4的上游，且該區域B4位在該區域B3的上游。

6.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該至少一自主引物包括三對自主引物，分別靶向區域F4、B4、F5、B5、F6、及B6，該區域F6依序位在該區域F5、該區域F4、及該區域F3的上游，且該區域B6依序位在該區域B5、該區域B4、及該區域B3的上游。

7.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該至少一自主引物的一工作濃度范圍為0.1μM至2μM。

8.如權利要求1所述的LAMP引物組，其中該從F3到B3的區域至少有200個核苷酸長。

9.一種擴增核酸的方法，包括步驟：

提供包括FIP、BIP、F3、與B3之原始LAMP引物，其中這些原始LAMP引物靶向核酸上的區域F3、F2、F1C、B1C、B2、及B3，且區域F3、F2、F1、B1C、B2C、及B3C在該核酸之一順向鏈的5’端往3’端依序排列，其中該引物FIP包括靶向該區域F1C及該區域F2的寡核苷酸，且該引物BIP包括靶向該區域B1C及該區域B2的寡核苷酸；

提供至少一自主引物，其中該至少一自主引物靶向的一區域位在從F3到B3的區域之外；以及

利用這些原始LAMP引物及該至少一自主引物擴增一樣本中的該核酸。

10.如權利要求9所述的擴增核酸的方法，其中該核酸系通過具有鏈置換活性的一聚合酶來進行擴增。

11.如權利要求9所述的擴增核酸的方法，其中該核酸為DNA、RNA、或其組合。

12.如權利要求9所述的擴增核酸的方法，其中該至少一自主引物靶向的該區域位在該區域F3的上游或該區域B3的上游。

13.如權利要求9所述的擴增核酸的方法，其中該至少一自主引物包括至少一對自主引物，分別靶向區域F4及區域B4，該區域F4位在該區域F3的上游，且該區域B4位在該區域B3的上游。

14.如權利要求9所述的擴增核酸的方法，其中該至少一自主引物包括兩對自主引物，分別靶向區域F4、B4、F5、及B5，該區域F5位在該區域F4的上游，該區域F4位在該區域F3的上游，該區域B5位在該區域B4的上游，且該區域B4位在該區域B3的上游。