[發明專利]一種基于微流控芯片的核酸檢測方法及系統

有效

• 申請號: 202210670752.3
• 申請日: 2022-06-15
• 公開（公告）號: CN114752658B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 顏菁;程林;孟潤榮
• 申請（專利權）人: 江蘇匯先醫藥技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6844
• 分類號: C12Q1/6844;C12Q1/6806;C12M1/34;C12M1/32;C12M1/00;B01L3/02;B01L3/00
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 李萍

本發明公開了一種基于微流控芯片的核酸檢測方法及系統。該核酸檢測方法包括：（1）將樣本放入樣本采集管內，樣本采集管內預先存放有核酸裂解液，使樣本和核酸裂解液混勻反應，得到裂解產物混合液；（2）將定量移液裝置插入樣本采集管內并定量吸取裂解產物混合液，定量移液裝置的移液腔中預先存放有固體形式的核酸擴增試劑，在移液的過程中使裂解產物混合液和核酸擴增試劑混勻；（3）定量移液裝置將其移液腔中的液體定量加入微流控芯片內，在加樣的過程中，液體進入芯片的反應倉中和環介導等溫擴增引物混合；（4）將微流控芯片裝入LAMP檢測儀中。本發明保證檢測準確性的同時減小設備成本。

技術領域

本發明涉及一種基于微流控芯片的核酸檢測方法及系統。

背景技術

目前，在核酸檢測過程中，采集的核酸樣本至少需要先后經過如下步驟：裂解提取核酸，與核酸擴增試劑（如酶等）、引物混合進行擴增。其中的一種較為方便的檢測方式為在一個微流控芯片內完成上述全部的步驟，但需要在芯片內額外設置較多的腔室，以用于存放裂解及中和液等核酸提取試劑，或提供核酸樣本和這些試劑混合反應的空間；此外，還需要在芯片上設置活塞、閥門等來控制樣本和試劑的混合、流動等。這都使得微流控芯片的結構較為復雜，而且與其配套的核酸分析儀也需對應設置用于驅動這些活塞、閥門的驅動機構，使得整個檢測系統較為復雜，設備成本較高。而傳統的手動測試方法需要多次移液，難以準確定量移液或需要使用昂貴的移液槍，且污染風險較高。

發明內容

針對上述技術問題，本發明提供一種基于微流控芯片的核酸檢測方法，其保證檢測準確性的同時減小設備成本。

本發明還提供一種基于微流控芯片的核酸檢測系統，其避免使用結構復雜的核酸分析儀及移液槍，同時保證檢測準確性，減小設備成本。

一種基于微流控芯片的核酸檢測方法，包括如下步驟：

（1）將樣本放入樣本采集管內，所述樣本采集管內預先存放有核酸裂解液，使所述樣本和所述核酸裂解液混勻反應，得到裂解產物混合液；

（2）將定量移液裝置插入所述樣本采集管內并定量吸取所述裂解產物混合液，所述定量移液裝置的移液腔中預先存放有固體形式的核酸擴增試劑，在移液的過程中使所述裂解產物混合液和所述核酸擴增試劑混勻；

（3）所述定量移液裝置將其移液腔中的液體定量加入微流控芯片內，所述微流控芯片具有一或多個預先存放有環介導等溫擴增引物的反應倉，在加樣的過程中，液體進入所述反應倉中和所述環介導等溫擴增引物混合；

（4）將所述微流控芯片裝入LAMP檢測儀中，進行環介導等溫擴增和熒光分析檢測。

該核酸檢測方法不是用于免疫診斷治療目的。

優選地，步驟（2）中的所述核酸擴增試劑以凍干球形式存放在所述移液腔中。

更優選地，所述凍干球包括擴增用酶、三磷酸脫氧核苷酸和緩沖液。具體地，所述凍干球包括dATP、dTTP、dCTP、dGTP、甜菜堿、Tris-HCl、KCl、MgSO4、(NH4)2SO4、TritonX-100、Bst DNA聚合酶及凍干保護劑。當裂解產物混合液進入移液腔中后和凍干球接觸，使其復溶，裂解出的核酸分子和這些擴增用酶、三磷酸脫氧核苷酸和緩沖液混合。在移液的過程中即實現核酸分子和擴增試劑的混合，減少了移液次數，減小了多次移液導致的人為操作誤差。

優選地，所述樣本通過口腔拭子或咽拭子采集，所述核酸裂解液包括生理鹽水，所述核酸檢測方法的檢測對象為呼吸道病毒。