[發明專利]一種基于微流控芯片的核酸檢測方法及系統

有效

• 申請號: 202210670752.3
• 申請日: 2022-06-15
• 公開（公告）號: CN114752658B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 顏菁;程林;孟潤榮
• 申請（專利權）人: 江蘇匯先醫藥技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6844
• 分類號: C12Q1/6844;C12Q1/6806;C12M1/34;C12M1/32;C12M1/00;B01L3/02;B01L3/00
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司 32103
• 代理人: 李萍

1.一種基于微流控芯片的核酸檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將樣本放入樣本采集管內，所述樣本采集管內預先存放有核酸裂解液，使所述樣本和所述核酸裂解液混勻反應，得到裂解產物混合液；

（2）將定量移液裝置插入所述樣本采集管內并定量吸取所述裂解產物混合液，所述定量移液裝置的移液腔中預先存放有固體形式的核酸擴增試劑，在移液的過程中使所述裂解產物混合液和所述核酸擴增試劑混勻；

（3）所述定量移液裝置將其移液腔中的液體定量加入微流控芯片內，所述微流控芯片具有一或多個預先存放有環介導等溫擴增引物的反應倉，在加樣的過程中，液體進入所述反應倉中和所述環介導等溫擴增引物混合；

（4）將所述微流控芯片裝入LAMP檢測儀中，進行環介導等溫擴增和熒光分析檢測；

其中，所述定量移液裝置包括筒體、可相對所述筒體上下移動的活塞桿、連接于所述活塞桿上的活塞、及與所述活塞桿連接或一體設置的定位件，所述筒體包括內筒及套于所述內筒外的外筒，所述移液腔形成于所述內筒中，所述活塞可上下移動地設置于所述移液腔中，且所述活塞和所述內筒的內壁之間密封，所述定位件可上下移動地插設于所述內筒和所述外筒之間，所述定位件上具有第一限位部，所述外筒上具有與所述第一限位部相配合的第二限位部，所述定位件具有第三限位部；

步驟（2）中，所述定量移液裝置在插入所述樣本采集管之前處于初始狀態，此時所述第三限位部抵在所述外筒的上端面上；插入后，向上拉所述活塞桿，將所述裂解產物混合液吸至所述移液腔中，和所述核酸擴增試劑混合；直至所述第一限位部抵在所述外筒上的第二限位部后，吸液停止；

步驟（3）中，向下推所述活塞桿，將所述移液腔中混勻后的液體推入所述微流控芯片內，直至所述第三限位部抵在所述外筒和/或內筒的上端面，加樣停止。

2.根據權利要求1所述的核酸檢測方法，其特征在于，步驟（2）中的所述核酸擴增試劑以凍干球形式存放在所述移液腔中。

3.根據權利要求2所述的核酸檢測方法，其特征在于，所述凍干球包括擴增用酶、三磷酸脫氧核苷酸和緩沖液。

4.根據權利要求1所述的核酸檢測方法，其特征在于，所述核酸裂解液包括生理鹽水。

5.根據權利要求1所述的核酸檢測方法，其特征在于，所述內筒的下端形成有和所述移液腔連通的移液口，在所述初始狀態時所述活塞和所述移液口之間具有一段距離，所述核酸擴增試劑位于所述活塞和所述移液口之間。

6.根據權利要求1所述的核酸檢測方法，其特征在于，所述內筒的外徑小于所述樣本采集管的外徑，所述內筒的下端開設有通孔作為移液口，步驟（2）中，所述內筒插入所述樣本采集管中，使所述移液口浸入所述樣本采集管內的裂解產物混合液中；或，步驟（3）中，所述定量移液裝置的移液口插入所述微流控芯片的加樣口中，通過所述活塞的推力驅使所述液體自所述加樣口進入所述反應倉內，加樣完成后，將所述微流控芯片的密封折耳折彎后蓋在所述加樣口上。

7.根據權利要求6所述的核酸檢測方法，其特征在于，所述微流控芯片的加樣口和所述反應倉之間通過微通道直接連通，所述微通道具有一或多個彎折部。