[發明專利]一種印度不動桿菌及其用途

在審

• 申請號: 202210654788.2
• 申請日: 2022-06-10
• 公開（公告）號: CN114891694A
• 公開（公告）日: 2022-08-12
• 發明（設計）人: 張倩穎;李東亮;賈云;張娟;蔣忠榮;李品鶴;鄭天飛;王躍;陳堅;李江華
• 申請（專利權）人: 四川中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01;A24B15/20
• 代理公司: 四川省成都市天策商標專利事務所(有限合伙) 51213
• 代理人: 劉興亮

本發明公開了一種印度不動桿菌及其用途，本發明的印度不動桿菌Acinetobacter indicusSCT?B2，保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，其保藏編號為：CGMCC NO.23679。本發明的菌株在生長過程中可以分解利用煙葉并產生多種風味物質。將該菌株的發酵液或菌體按照煙葉重量的1～5％，加入到含水量為20～40％的雪茄煙草中，發酵15～30天可以明顯提升雪茄煙葉的豆香香韻，明顯減少煙葉刺激性，減少雜氣，煙氣柔和，煙香增加，感官質量明顯改善。

技術領域

本發明涉及煙草加工技術領域，尤其涉及一種印度不動桿菌及其用途。

背景技術

煙葉發酵是煙草加工過程中的重要環節之一，發酵的主要目的是促進煙葉化學成分及物理性能的變化，從而改善煙葉的內在品質，提高煙葉的使用價值。通過發酵處理，可使煙葉的青雜氣減少，刺激性降低，煙葉特征香氣顯露，香氣質變好、香氣量增加，煙氣由粗糙變得細膩，吃味變得醇和，可用性提高。煙葉發酵過程主要是主要由煙葉中的微生物群落驅動。然而，這些過程漫長且不受控制。現代人工發酵一直試圖通過調整發酵條件或在自然發酵群落中添加特殊配方的發酵劑來控制過程。采用外接微生物發酵技術，可以縮短煙葉發酵時間，提高有效作業率，可以賦予煙葉自然、醇和芳香，除去苦澀、青雜氣味，諧調因含氮過高而引起的辛辣味，對提高煙葉品質有重要作用。外加微生物可能并不總是產生積極的結果，因為接種的微生物無法驅動群落向有利于產品發酵的方向進化。主要原因是接種微生物(外在)和天然微生物(內在)之間的微生物相互作用導致微生物群落的結構和功能不完整。微生物相互作用，如共生、協同、捕食、寄生和競爭，可以極大地影響微生物群落的代謝活動。

發明內容

本發明的目的就在于為了解決上述問題而提供一種印度不動桿菌及其用途，本發明通過前期篩選的產香微生物，添加至雪茄煙葉中進行強化發酵，煙葉可用性明顯提高。

本發明通過以下技術方案來實現上述目的：

本發明的第一個方面是提供一種印度不動桿菌Acinetobacter indicus SCT-B2，所述印度不動桿菌Acinetobacter indicus SCT-B2，已于2021年10月28日保藏在中國普通微生物菌種保藏管理中心，其簡稱為CGMCC，保藏編號為CGMCC NO.23679保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，郵政編碼100101。

所述印度不動桿菌為所述菌株為革蘭陰性桿菌，專性需氧，多為球桿狀、常呈雙排列，可單個存在，有時形成絲狀和鏈狀，黏液型菌株有莢膜，無芽孢，無鞭毛，最適生長溫度為35℃。

本發明另一方面還提供了所述的印度不動桿菌在微生物培養、煙葉發酵中的用途。

本發明又一方面還提供了所述的一種印度不動桿菌的獲取方法，包括以下步驟：

(1)振蕩洗脫煙葉上的微生物，離心收集微生物；

(2)將收集的微生物復溶后加入熒光染料cy5-hydrazide，在暗處染色；

(3)差速離心分離微生物和未結合的染料，先通過熒光顯微鏡檢測菌株的染色情況，然后通過流式細胞儀將被熒光標記的菌株分選至裝有YH培養基的96深孔板中進行培養；

(4)通過2，4-硝基苯肼測定培養基中醛酮化合物的含量，再使用GC-MS鑒定產物的種類，所得的菌株即為印度不動桿菌Acinetobacter indicus SCT-B2。

通過上述方法得到的菌株的培養步驟為：

平板培養：蛋白胨10g，酵母粉5g，氯化鈉10g，瓊脂15g，蒸餾水1000mL，pH 7.0，將冷凍保存的甘油懸液接種到平板上，37℃恒溫培養24h；或