[發明專利]一種穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株及其構建方法和應用

在審

• 申請號: 202210654292.5
• 申請日: 2022-06-10
• 公開（公告）號: CN114921493A
• 公開（公告）日: 2022-08-19
• 發明（設計）人: 陳淑;羅貝·彼特;維杰·潘迪;張熙;木蘭;黃鵬;黃晶;郝俊丞
• 申請（專利權）人: 清華大學深圳國際研究生院
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/53;C12N5/10;C12N5/09;A01K67/027;C12Q1/02
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 范盈;姚幸茹

1.一種穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)轉染表達熒光素酶基因的載體進入MCF7細胞，篩選穩定表達熒光素酶基因的MCF7細胞；

(2)將步驟(1)所述穩定表達熒光素酶基因的MCF7細胞進行裸鼠原位異種移植成瘤實驗，腫瘤大小超過100mm³時，注射不斷增大劑量的他莫昔芬治療，腫瘤在治療期間形成持續增殖的腫瘤塊，取出該腫瘤塊原代培養，獲得的細胞即為穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，步驟(2)中，當裸鼠成瘤后腫瘤大小超過100mm³時，依次分別按照5mg/kg，10mg/kg，20mg/kg，50mg/kg劑量腹腔注射給予他莫昔芬治療各1周，此后以50mg/kg劑量腹腔注射給予他莫昔芬治療6周。

3.權利要求1或2所述構建方法構建獲得的穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株。

4.一種穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株，其特征在于，其分類命名為人源雌激素受體陽性乳腺癌細胞CS-MCF7-TR，保藏編號為CCTCC NO:C2022118。

5.權利要求3或4所述穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株作為腫瘤耐藥或轉移機制研究的細胞模型的應用。

6.權利要求3或4所述穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株作為腫瘤靶向治療位點篩選細胞模型的應用。

7.權利要求3或4所述穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株作為腫瘤靶向治療藥物篩選細胞模型的應用。

8.根據權利要求5-7任一項所述的應用，其特征在于，所述腫瘤為晚期雌激素受體陽性乳腺癌。

9.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，權利要求3或4所述穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株作為他莫昔芬耐藥腫瘤的靶向治療位點篩選細胞模型的應用。

10.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，權利要求3或4所述穩定表達Luciferase的他莫昔芬耐藥細胞株作為他莫昔芬耐藥腫瘤的靶向治療藥物篩選細胞模型的應用。