[發(fā)明專利]一種小米抗氧化活性肽的制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210650995.0 | 申請(qǐng)日: | 2022-06-10 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN114921517A | 公開(kāi)(公告)日: | 2022-08-19 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 王俊平;賈木春;王子驍 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 天津科技大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12P21/06 | 分類號(hào): | C12P21/06;C07K1/14 |
| 代理公司: | 天津合正知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12229 | 代理人: | 張艷梅 |
| 地址: | 300457 *** | 國(guó)省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 小米 氧化 活性 制備 方法 | ||
1.一種小米抗氧化活性肽的制備方法,包含以下步驟:小米蛋白的提取純化,小米蛋白的酶解和多肽分離,其特征在于,
小米蛋白的提取純化方法包括以下步驟:
稱取一定量小米,用組織搗碎機(jī)粉碎,過(guò)80目篩,按料液比1:3-5加入正己烷,混合后在室溫下充分?jǐn)嚢?-4h,然后靜置1-3h,重復(fù)2-3次后傾去上清液,將沉淀物在通風(fēng)櫥風(fēng)干后得脫脂小米粉;在小米粉中按1:10-15加入蒸餾水,然后用1mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至8-10,再用超聲處理30-50min,磁力攪拌1-2h,接著5000-8000r/min離心10-15min,取上清液以1mol/L的鹽酸調(diào)pH至3-4,然后收集沉淀,透析除鹽,最后冷凍干燥得到小米蛋白粉;
小米蛋白的酶解和多肽分離包括以下步驟:
首先將小米蛋白粉溶解為4-6%(w/v)的溶液,然后將pH值調(diào)為9-10,然后在沸水浴中加熱15-30min,再降溫至55-65℃,加入5000-8000u/g底物的Alcalase 3.0T堿性蛋白酶,反應(yīng)1-2h,然后再迅速升溫至100℃滅酶10-15min,然后再降溫至40-50℃,將pH值調(diào)為7.5-8.5,中性蛋白酶的添加量為2000-3000u/g底物,反應(yīng)2-4h后迅速升溫至100℃將酶滅活10-15min,5000-7000r/min,離心時(shí)間為15-25min離心后取上清液,再冷凍干燥得一種小米抗氧化活性肽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小米抗氧化活性肽的制備方法,其特征在于:每次冷凍干燥之前需要在-80-60℃下預(yù)凍18-24h,然后再凍干24-30h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2任一權(quán)利要求所述的一種小米抗氧化活性肽的制備方法制得的小米活肽肽段0.5-1KD。
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