[發明專利]一種人血清琥珀酸檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202210639496.1
• 申請日: 2022-06-07
• 公開（公告）號: CN114807296A
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 吳向東;吳傳俠;陳小茹
• 申請（專利權）人: 深圳上泰生物工程有限公司
• 主分類號: C12Q1/32
• 分類號: C12Q1/32;C12Q1/48;C12Q1/25;G01N21/33;G01N21/75
• 代理公司: 廣東普潤知識產權代理有限公司 44804
• 代理人: 寇闖

本發明公開了一種人血清琥珀酸檢測試劑盒，涉及醫學檢驗技術領域。包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1包括第一緩沖液、ATP、CoA、NADH、LDH和LDH激活劑，所述試劑R2包括第二緩沖液、PEP、SCS和PK。應用該檢測試劑盒可以實現在全自動生化分析儀上對琥珀酸的測定，可以高通量、快速化、精確地確定樣品中的琥珀酸含量，且具有操作簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，有效降低琥珀酸檢測成本，有利于臨床廣泛推廣使用。

技術領域

本發明屬于醫學檢驗技術領域，涉及一種人血清琥珀酸檢測試劑盒。

背景技術

急性主動脈夾層(AAD)是高風險的心血管疾病，目前還沒有有效的藥物可以預防AAD的發生和發展。巨噬細胞在AAD的發展中起重要作用。而琥珀酸鹽會引發巨噬細胞的炎癥變化。近日，European Heart Journal雜志發表了北京大學基礎醫學院心血管研究所鄭樂民教授和武漢同濟醫院汪道文教授兩個研究團隊合作的研究成果，其中該團隊通過代謝組學分析同時結合臨床資料發現在AAD患者血漿中琥珀酸水平明顯升高，證明琥珀酸可以作為診斷AAD的新型生物標志物，并且揭示了琥珀酸促進AAD進展的機制，通過抑制琥珀酸積累，可以緩解AAD的進展，為AAD提供了新的治療靶點。

琥珀酸(C₄H₆O₄)分布在所有的植物和動物組織中，最初是從琥珀中提取的。由于其低毒性，廣泛應用于農業、食品和制藥行業。它是細胞呼吸和細胞內能量產生的最活躍的成分之一。琥珀酸或琥珀酸含量的測定是分析檸檬酸循環的關鍵。到目前為止，僅有用于動物、食品等的檢測試劑盒，還未有應用于人血樣本的，這難以滿足行業發展的需要。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種人血清琥珀酸檢測試劑盒。

本發明是這樣實現的，一種人血清琥珀酸檢測試劑盒，包括試劑R1和試劑R2，所述試劑R1包括第一緩沖液、ATP、CoA(輔酶a)、NADH、LDH(乳酸脫氫酶)和LDH激活劑，所述試劑R2包括第二緩沖液、PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)、SCS(琥珀酰輔酶a合成酶)和PK(丙酮酸激酶)。

進一步地，所述ATP的濃度為0.1～50g/L，所述CoA的濃度為0.3～5g/L，所述NADH的濃度為0.1～10g/L，所述LDH的酶量為0.5～10KU，所述PEP的濃度為0.5～10g/L，所述SCS的酶量為1～50KU，所述PK的酶量為0.5～20KU。

進一步地，所述ATP的濃度為0.9～1.1g/L，所述CoA的濃度為0.9～1.1g/L，所述NADH的濃度為0.9～1.1g/L，所述LDH的酶量為0.9～1.1KU，所述PEP的濃度為1.8～2.2g/L，所述SCS的酶量為9～11KU，所述PK的酶量為4.0～5.0KU。

進一步地，所述第一緩沖液為磷酸鹽、三羥甲基甲基甘氨酸、三甲基甘氨酸、N，N-二-羥乙基甘氨酸、N-三羥甲基甲基-3-氨基丙烷磺酸和三羥甲基氨基甲烷中的任意一種，所述第二緩沖液為磷酸鹽、3-嗎啉丙磺酸、3-N-嗎啉基-2-羥基丙磺酸、哌嗪-1，4-羥基二丙磺酸、N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸和三羥甲基氨基甲烷中的任意一種，所述第一緩沖液和所述第二緩沖液的濃度均為10～100mM。

進一步地，所述試劑R1還包括第一防腐劑，所述第一防腐劑為疊氮鈉(NaN₃)、苯甲酸鈉和ProClin300中的任意一種，所述試劑R2還包括第二防腐劑，所述第二防腐劑為疊氮鈉和ProClin300中的任意一種，所述第一防腐劑和所述第二防腐劑的濃度均為0.1～1g/L。

進一步地，所述LDH激活劑為氯化鎂、硫酸鎂和碳酸鎂中的任意一種或多種，所述LDH激活劑的濃度為1～30mM(mmol/L)。

進一步地，所述試劑R1還包括0.1～5mM的EDTA。