[發明專利]一種赭鹿花菌分子身份證及其擴增引物、檢測試劑盒和物種鑒定方法在審
| 申請號: | 202210623852.0 | 申請日: | 2022-06-02 |
| 公開(公告)號: | CN114774580A | 公開(公告)日: | 2022-07-22 |
| 發明(設計)人: | 田恩靜;謝曉梅;段仁和;曹廣乘 | 申請(專利權)人: | 吉林農業大學 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385 | 代理人: | 戴嵩瑋 |
| 地址: | 130118 吉林*** | 國省代碼: | 吉林;22 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 赭鹿花菌 分子 身份證 及其 擴增 引物 檢測 試劑盒 物種 鑒定 方法 | ||
1.一種赭鹿花菌分子身份證,其特征在于,赭鹿花菌分子身份證的核苷酸序列如SEQID NO:1所示或與SEQ ID NO:1互補的序列。
2.一種特異性擴增權利要求1所述赭鹿花菌分子身份證的引物,其特征在于,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的反向引物。
3.一種鑒定赭鹿花菌的檢測試劑盒,其特征在于,包括權利要求2所述引物和檢測試劑。
4.根據權利要求3所述檢測試劑盒,其特征在于,所述檢測試劑包括PCR擴增用試劑。
5.根據權利要求3或4所述檢測試劑盒,其特征在于,所述檢測試劑盒還包括陽性標準品;
所述陽性標準品為權利要求1所述赭鹿花菌分子身份證。
6.一種赭鹿花菌的物種鑒定方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)提取待檢測樣本的基因組DNA;
2)以步驟1)中所述基因組DNA為模板,用權利要求2所述引物進行PCR擴增,得到PCR產物;
3)將所述PCR產物進行電泳和測序,得到122bp的序列判斷待檢測樣本為赭鹿花菌。
7.根據權利要求6所述物種鑒定方法,其特征在于,步驟2)中PCR擴增的反應體系總體系為25μL,包括12.5μL的2×Taq PCR Master Mix12.5μL,2μM上游引物和2μM下游引物各1μL,2μL10ng/μLDNA模板,余量的ddH2O。
8.根據權利要求6所述物種鑒定方法,其特征在于,步驟2)中PCR擴增的反應程序為94℃4min;94℃40s,55℃30s,72℃30s,34個循環;72℃10min。
9.權利要求1所述赭鹿花菌分子身份證、權利要求2所述引物或權利要求3~5任意一項所述檢測試劑盒在鑒別赭鹿花菌和近緣種中的應用。
10.根據權利要求9所述應用,其特征在于,所述近緣種包括以下一種或幾種:鹿花菌、大鹿花菌、彈性馬鞍菌、羊肚菌、波地鐘菌、膠陀螺和粗柄馬鞍菌。
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