[發(fā)明專利]一種nAChR受體α3β2亞型抑制失活型阻斷劑、其制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210620322.0
• 申請日: 2022-06-01
• 公開（公告）號: CN114853864B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 董帥;張寶建;孫鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 海南大學(xué)
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/107;C07K1/06;C07K1/34;A61K38/17;A61K47/64;A61K47/42;A61P29/00;A61P25/34;A61P25/32;A61P25/36;A61P35/00;A61P25/00
• 代理公司: 山東重諾律師事務(wù)所 37228
• 代理人: 孫瑋

本發(fā)明公開一種nAChR受體α3β2亞型抑制失活型阻斷劑、其制備方法及應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過對α?芋螺毒素中的2,4位二硫鍵進行連接子插入修飾，以喪失α?芋螺毒素對nAChR受體α3β2亞型抑制活性，并保持對nAChR受體其它亞型的抑制活性。α?芋螺毒素被改造后，表現(xiàn)為對其它nAChR受體亞型的選擇性增強，提高了α?芋螺毒素本身的特異性，使α?芋螺毒素相對特異性地作用于nAChR受體其它亞型，而不受α3β2亞型被抑制后所帶來的不可預(yù)期的副作用干擾。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種nAChR受體α3β2亞型抑制失活型阻斷劑、其制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

乙酰膽堿受體(nAChR)是由5個亞基組成的同源或異源跨膜五聚體，能夠參與介導(dǎo)學(xué)習(xí)、感覺、疼痛等等多種神經(jīng)信號傳導(dǎo)。nAChR受體包括肌肉型或神經(jīng)型兩大類，廣泛分布于中樞、外周神經(jīng)系統(tǒng)以及肌肉中。神經(jīng)型nAChR受體由12種亞基(α2-α7、α9、α10及β2-β4)組成，而肌肉型nAChR由5種亞基(α1、β1、γ、δ、ε)組成。nAChR受體是篩選、診斷和治療一大類重要疾病的關(guān)鍵靶點，這些疾病包括疼痛、煙酒和毒品成癮、乳腺癌、肺癌以及中樞神經(jīng)紊亂等。

α-芋螺毒素是人們最早發(fā)現(xiàn)且研究最多的一大類芋螺毒素。α-芋螺毒素一級結(jié)構(gòu)一般由10-30個氨基酸殘基組成，含有四個半胱氨酸(Cys?I-IV)，其大部分半胱氨酸框架為I型框架，即CCXmCXnC(X代表氨基酸殘基，m和n代表數(shù)量)，通常以CysI-CysIII，CysII-CysIV的形式形成兩對二硫鍵。根據(jù)m和n的不同，又可將α-芋螺毒素分為3/5、3/6、4/2、4/3、4/4、4/5、4/6、4/7、4/8等亞家族。截止2019年，已知的I型框架芋螺毒素共有691個，其中以4/7型最多，3/5型次之。α-芋螺毒素對nAChR各種亞型具有較好的抑制作用。因此，α-芋螺毒素是研究nAChR各種亞型精細(xì)結(jié)構(gòu)和生理藥理功能的寶貴分子探針，且還是治療nAChR受體相關(guān)疾病的新藥來源。

nAChR受體具有多種亞型，不同nAChR受體亞型參與生物體中不同的神經(jīng)生理和病理過程。因此，在藥物以及分子探針的開發(fā)中，發(fā)現(xiàn)高效、特異性作用于nAChR某一亞型的抑制劑具有重要意義。nAChR受體α3β2亞型在生物體內(nèi)分布廣泛，從背根神經(jīng)節(jié)、脊髓到自主神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元等均有表達。α-芋螺毒素在阻斷其它受體亞型的同時，也會致使α3β2亞型被阻斷，從而帶來不可預(yù)期的副作用。因此，如何改造α-芋螺毒素使其對α3β2亞型的抑制活性降低或喪失，并對其它亞型保持特異的抑制活性，具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明嘗試對GIC、[A10L]PnIA、LtIA以及LsIA等4/7型α-芋螺毒素的二硫鍵進行修飾，即在二硫鍵中插入連接骨架，通過研究發(fā)現(xiàn)，1,3位二硫鍵的修飾產(chǎn)物喪失對所有nAChR受體亞型的活性，而多種2,4位二硫鍵的修飾產(chǎn)物則在喪失對nAChR受體α3β2亞型阻斷活性的基礎(chǔ)上，保持對其它受體亞型的阻斷活性。其中，所述nAChR受體其它亞型包括但不限于α2β2、α2β4、α3β4、α4β2、α4β4、α6/α3β4、α6/α3β3β2、α7、α9α10、α1β1δε。

為此，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

α-芋螺毒素2,4位二硫鍵修飾在制備nAChR受體α3β2亞型抑制失活型阻斷劑中的應(yīng)用。

上述技術(shù)方案中，所述2,4位二硫鍵修飾為：在2,4位二硫鍵中插入連接骨架。所述連接骨架包括但不限于間二甲苯基、鄰二甲苯基或?qū)Χ妆交涓髯越Y(jié)構(gòu)如下所示：