[發明專利]一種新型高穩定性線粒體熒光探針及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202210618852.1
• 申請日: 2022-06-01
• 公開（公告）號: CN114907332A
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 程國輝;陳明慧;王玉鑫;湯武玥
• 申請（專利權）人: 徐州醫科大學
• 主分類號: C07D409/06
• 分類號: C07D409/06;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 徐州先卓知識產權代理事務所(普通合伙) 32555
• 代理人: 陳俊杰

1.一種新型高穩定性線粒體熒光探針，其特征在于，其結構式為：

2.如權利要求1所述的一種新型高穩定性線粒體熒光探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)先將4-溴-三苯胺1.5-2g、4-甲酰苯基硼酸1.2-1.8g、雙三苯基磷二氯化鈀0.1-0.5g、碳酸鉀2-5g混合于30-60mL四氫呋喃中，然后將混合物在50-65℃攪拌反應20-25h，分離得到5-(4-(二苯基氨基)苯基)噻吩-2-甲醛；

2)將4-甲基吡啶2-3g和2-溴乙醇3-6g溶于30-50mL乙腈中，75-90℃加熱回流18-30h，減壓除溶劑，經乙醚沉淀得到1-(2-羥乙基)-4-甲基吡啶-溴化物；

3)將制得的5-(4-(二苯基氨基)苯基)噻吩-2-甲醛1-2g、1-(2-羥乙基)-4-甲基吡啶-溴化物1-2g和哌啶1-3滴加入到30-50mL氯仿中，于50-65℃加熱回流反應10-15h，經乙醚沉淀得到所述新型高穩定性線粒體熒光探針。

3.如權利要求2所述的一種新型高穩定性線粒體熒光探針的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中4-溴-三苯胺1.8g、4-甲酰苯基硼酸1.5g、雙三苯基磷二氯化鈀0.33g、碳酸鉀3.24g混合于四氫呋喃50mL中。

4.如權利要求2所述的一種新型高穩定性線粒體熒光探針的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中采用柱層析分離得到5-(4-(二苯基氨基)苯基)噻吩-2-甲醛。

5.如權利要求2所述的一種新型高穩定性線粒體熒光探針的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中4-甲基吡啶2.5g和2-溴乙醇5g溶于40mL乙腈中。

6.如權利要求2所述的一種新型高穩定性線粒體熒光探針的制備方法，其特征在于，所述步驟3)中5-(4-(二苯基氨基)苯基)噻吩-2-甲醛1.67g、1-(2-羥乙基)-4-甲基吡啶-溴化物1.63g、哌啶2滴加入到40mL氯仿中。

7.如權利要求1所述的一種新型高穩定性線粒體熒光探針在制備活細胞線粒體熒光成像試劑中的應用。

8.如權利要求6所述的應用，其特征在于，所述活細胞為CT26結腸癌細胞。

9.如權利要求6所述的應用，其特征在于，將含有所述線粒體熒光探針的溶液浸染活細胞，所述溶液為Tris-鹽酸緩沖液。