[發明專利]一種樹突狀細胞體外高效擴增體系在審
| 申請號： | 202210614803.0 | 申請日： | 2022-06-01 |
| 公開（公告）號： | CN114934016A | 公開（公告）日： | 2022-08-23 |
| 發明（設計）人： | 葉永清;黃能平;楊麗秋 | 申請（專利權）人： | 廈門三一造血技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0784 | 分類號： | C12N5/0784 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 361012 福建省廈門市中國（福建）自由貿易試*** | 國省代碼： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 樹突 細胞 體外 高效 擴增 體系 | ||
【權利要求書】：
1.一種DC細胞體外高效擴增系統，其特征在于使用特定因子組合I從外周血單個核細胞中直接擴增DC前體細胞，再使用特定因子組合II從DC前體細胞中擴增出大量功能性DC細胞。
2.根據權利要求1所述的特定因子組合I包括：以IMDM作為基礎培養基加入5 ng/mLSCF、20nM hydrocortisone、 10ng/mLIL-6、 5ng/mL Flt-3L、5ng / mLIL-1β、20ng/mL GM-CSF以及帕洛沙姆10μg/ml。
3.根據權利要求1所述的特定因子組合II包括：以F12/DMEM作為基礎培養基加入0.5μg/mL PGE2以及20ng/mL TNF-α。
4.根據權利要求1所述的DC細胞體外高效擴增體系，具體培養步驟如下：
步驟一：分離PBMC細胞，以1.5x10^6/ml 細胞加入含有組份I的培養基；
步驟二：每隔3-5天根據細胞生長狀況補加等倍新鮮培養基；
步驟三：培養第10天，300g 10min離心洗滌收獲細胞后，加入組份II培養基持續培養至15天；
步驟四：收獲DC細胞，分析生長動力學、表面抗原表達、內吞能力、混合淋巴細胞反應、特異性細胞因子分泌等指標，對誘導的DC進行表征。
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