[發明專利]新月彎孢霉甾體C14α-羥化酶CYP5103B5突變體構建及其應用在審
| 申請號： | 202210604268.0 | 申請日： | 2022-05-31 |
| 公開（公告）號： | CN114958787A | 公開（公告）日： | 2022-08-30 |
| 發明（設計）人： | 劉曉光;喬江羽;路福平;毛淑紅;王碩 | 申請（專利權）人： | 天津科技大學 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/81;C12N1/19;C12P33/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 300457 天津市經濟*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 新月 彎孢霉甾體 c14 羥化酶 cyp5103b5 突變體 構建 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.C14α-羥化酶基因突變體Y10(S129A/T130A/D131G/T132L/V133I/R134K/S135K)、D131G其特征在于，所述突變體的氨基酸序列是在如SEQ ID NO：1所示的序列基礎上進行突變，突變體的氨基酸序列如SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：5所示，其相應的DNA序列分別如SEQID NO：4和SEQ ID NO：6所示。
2.權利要求1所述的C14α-羥化酶基因突變體Y10(S129A/T130A/D131G/T132L/V133I/R134K/S135K)、D131G其特征在于，用于轉化甾體孕酮生產14α-羥基孕酮。
3.如權利要求2所述的用途，其特征在于，C14α-羥化酶基因突變體S129A/T130A/D131G/T132L/V133I/R134K/S135K、D131G轉化甾體孕酮時羥化特異性提高，副產物明顯減少。
4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，重組表達載體或重組釀酒酵母宿主菌表達C14α-羥化酶突變體的應用。
5.一種制備C14α-羥基孕酮的方法，其特征在于，利用權利要求4所述的重組釀酒酵母，發酵轉化底物孕酮，并從發酵液萃取C14α-羥基孕酮產物。
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