[發明專利]一種微生物菌落總數限度檢測方法

在審

• 申請號: 202210598465.6
• 申請日: 2022-05-30
• 公開（公告）號: CN114752649A
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發明（設計）人: 儲團結
• 申請（專利權）人: 藥科國信（浙江）質量技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12M1/34;C12M1/26;C12M1/24;C12M1/12;C12M1/00
• 代理公司: 杭州卓然專利代理事務所(普通合伙) 33422
• 代理人: 馮笑男

1.一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一：將檢測使用的新型試管、鑷子、量筒、吸頭等器具進行滅菌處理；

步驟二：現取100ml pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液加入到一個所述新型試管中，再取供試品10g加入，最后進行混勻靜置，制成1∶10的供試品勻液；

步驟三：重新取一所述新型試管加入9ml pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，再加入所述步驟一中的1∶10的供試品勻液1ml，進行混勻靜置，制成1∶10²的供試品勻液。

步驟四：重新取一所述新型試管加入9ml pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，再加入所述步驟二中的1∶10²的供試品勻液1ml，進行混勻靜置，制成1∶10³的供試品勻液；

步驟五：取所述步驟二、所述步驟三、所述步驟四中的供試品勻液各1ml置直徑90mm的無菌平皿中，注入約20ml 45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養基或沙氏葡萄糖瓊脂培養基，混勻，凝固，倒置培養；

步驟六：另取pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液1ml，置無菌平皿中，注入培養基，凝固，倒置培養。

2.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述步驟一中采用125～130℃條件下的蒸汽進行滅菌，且時間在30～60分鐘。

3.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述步驟五中三份供試品勻液在制備完成后45分鐘內加入到胰酪大豆胨瓊脂培養基或沙氏葡萄糖瓊脂培養基中。

4.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述新型試管包括玻璃管體(10)，所述玻璃管體(10)中設置有試管內腔(12)，所述試管內腔(12)內固設有無菌濾膜(11)，所述試管內腔(12)下側出液處設置有引流圓球(13)，所述玻璃管體(10)上側外端面固定設置有兩個導入管(14)。

5.根據權利要求4所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：兩個所述導入管(14)關于所述玻璃管體(10)中心線呈左右對稱分布，每個所述導入管(14)靠近所述試管內腔(12)中心線方向端面均貫穿進入所述試管內腔(12)中，每個所述導入管(14)中間段均呈螺旋狀。

6.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述步驟五中每個稀釋級每種培養基制備兩個平板。

7.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述步驟六中每種計數用的培養基各制備兩個平板，作為陰性對照。

8.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述步驟五與所述步驟六中倒置培養時間相同，且時間區間為5～7天。

9.根據權利要求1所述的一種微生物菌落總數限度檢測方法，其特征在于：所述11內置濾膜規格為0.3～0.45μm。