[發明專利]石佛翠茶多糖及其提取方法和應用

在審

• 申請號: 202210587945.2
• 申請日: 2022-05-27
• 公開（公告）號: CN115449531A
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 張明珠;秦華光;穆丹;宋娜;趙雅璇;范文慧;許馨云;洪武炫;胡穎虹
• 申請（專利權）人: 安慶師范大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12P19/14;A61K31/715;A61K36/82;A61P39/06;A61P17/18;A61K8/73;A61Q19/08;A23L33/125;A61K127/00
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所(普通合伙) 43008
• 代理人: 黃麗

本發明公開了一種石佛翠茶多糖及其提取方法和應用，提取方法包括將石佛翠茶葉烘干和粉碎過篩，得茶粉，經脫脂、脫色，將所得預處理的茶粉與復合酶加入磷酸緩沖液中酶解，酶解產物鈍化、離心，第一上清液pH回調，沉淀加入水中升溫反應得水提產物，水提產物經離心，第二上清液pH回調后與第一上清液混合蒸發濃縮，加入無水乙醇，靜置后離心，沉淀烘干并除蛋白，靜置、離心，第三上清液回調至中性，經透析、蒸發濃縮和冷凍干燥，得石佛翠茶多糖。本發明制備的石佛翠多糖在體外表現出良好自由基清除效率，對自由基損傷導致的細胞活性降低表現出很好的改善效果并在細胞水平上對氧化損傷有修復作用，在食品、藥品、化妝品等領域有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明屬于天然產物多糖應用技術領域，涉及一種石佛翠茶多糖及其提取方法和應用，具體涉及一種夏秋茶樹鮮葉多糖-石佛翠茶多糖及其提取方法和在氧化損傷細胞修復上的新應用。

背景技術

細胞內天然存在的各種活性氧(ROS)自由基主要產生于各個組織和細胞的線粒體部位，但是線粒體也是細胞內對細胞生理變化最為敏感的細胞器之一，一旦細胞受到不同理化因素的脅迫就會抑制線粒體功能，表現為線粒體形態斷裂，膜電位消和甚至產生更多的ROS。ROS(尤其是H₂O₂和·OH)作為一種小分子可以自由的穿過細胞質膜進出細胞，因此，無論是外源性攝取還是內源性誘導的自由基的積累都會引起細胞病理狀態的生成，例如衰老、神經性衰退和癌癥等。外源性氧化物質引起細胞的氧化損傷也會反應在細胞內的各種抗氧化酶的水平上，不同來源多糖的抗氧化活性也會表現出對抗氧化酶活性的提升。抗氧化活性往往與抗衰老、免疫調節活性、降血糖以及抗腫瘤等生物學功能息息相關，尤其是免疫調節活性，因為氧自由基與某些生理活性物質的調控和炎癥免疫過程有重要關系，在病理情況下，自由基引起的細胞氧化損傷同樣也會作用于免疫系統，引起免疫功能降低。

在茶多糖多方面的生理活性中，茶多糖的降血糖活性最為人們所熟知，除此以外，茶多糖的抗氧化活性也是人們所津津樂道的，多糖作為一種多羥基的化合物，抗氧化活性是多糖的天然屬性。雖然對茶多糖抗氧化活性的研究也較多，但總是存在一定爭議，茶多糖作為一類復雜的天然大分子，它的生物活性容易受到諸多方面的影響，大到栽培環境、茶樹品種，小到采樣部位、采樣季節、成品茶制作方法，甚至是提取的工藝手段都會影響到茶多糖的生物活性。皖西南作為徽茶的主要產地，栽種了很多國家級的優良品種，本項目中所用石佛翠(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze cv.‘Shifocui’)品種于1989年開始選育，到2010年被確定為國家級優良品種。目前為止，該品種茶樹資源僅用于春茶生產，但其優異的抗寒性質使得該品種茶樹的夏秋茶和越冬代茶葉資源盛產，然而對該品種茶樹功能成分的研究尚未見報道。

熱水提取法是最常用的方法，該方法具有簡單、方便、成本低等優點，缺點是耗時長、產率低，然而植物多糖作為植物細胞內含物需要破碎細胞壁才能溶出，因此需要參與輔助水提醇沉的方法，常見的有酸提、堿提、超聲輔助等。本申請的發明人發現，石佛翠作為抗寒優良品種，其細胞壁的纖維素和果膠成分含量相對其他茶樹品種要高很多，基于酶的高效性，因此利用酶輔助法提取石佛翠多糖具有可行性。而酶的使用方法及其后續的水提醇沉方法均會影響茶多糖活性。

因此，基于生物活性，利用合理的提取手段可得到高活性的茶多糖，進行系統深入的藥理作用研究是之后的研究方向，以期為皖西南地區茶多糖產品的開發和茶資源高值化提供一定理論依據，提高資源利用率，幫助解決皖西南茶區夏秋茶、茶樹花棄采嚴重造成的茶農經濟效益低的問題。另外，基于茶葉功能成分良好的應用前景，國內外研究者針對特異性的功能成分的品種選育已經取得了一定的成效，但基于優質茶多糖種質資源的報道較少。因此進一步探究茶多糖的開發應用對于高多糖的茶樹品種的選育工作也具有一定的指導意義。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有技術的不足，提供一種具有良好的自由基清除效率、對自由基損傷導致的細胞活性降低表現出很好的改善效果并在細胞水平上對氧化損傷有修復作用的石佛翠茶多糖及其提取方法和應用。