[發明專利]石佛翠茶多糖及其提取方法和應用

在審

• 申請號: 202210587945.2
• 申請日: 2022-05-27
• 公開（公告）號: CN115449531A
• 公開（公告）日: 2022-12-09
• 發明（設計）人: 張明珠;秦華光;穆丹;宋娜;趙雅璇;范文慧;許馨云;洪武炫;胡穎虹
• 申請（專利權）人: 安慶師范大學
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12P19/14;A61K31/715;A61K36/82;A61P39/06;A61P17/18;A61K8/73;A61Q19/08;A23L33/125;A61K127/00
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所(普通合伙) 43008
• 代理人: 黃麗

1.一種石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將石佛翠茶葉進行烘干和粉碎過篩，得到茶粉，將茶粉用石油醚浸泡攪拌、抽濾，使茶粉脫脂，將脫脂后的茶粉用無水乙醇浸泡攪拌、抽濾，使茶粉脫色，經干燥后，得到預處理的茶粉；

(2)將預處理的茶粉和復合酶加入磷酸緩沖液中，所述復合酶為纖維素酶和離析酶，所述纖維素酶與離析酶的酶活比為1∶1～2，在45℃～55℃下進行酶解反應2h～3h，得到酶解產物；

(3)將酶解產物進行鈍化、離心，所得第一上清液回調pH值至6.9～7.2待用，所得沉淀加入水中升溫至70℃～80℃，反應1h～3h，得到水提產物；

(4)將水提產物進行離心，所得第二上清液回調pH值至6.9～7.2，然后與所述第一上清液混合，進行蒸發濃縮，加入無水乙醇，于4℃～6℃下靜置12h～16h，然后再次離心，將所得沉淀烘干，加三氯乙酸溶液除蛋白，pH控制在3.5～4.2；

(4)將上述除蛋白產物置于4℃～6℃靜置2h～3h，經離心后，得第三上清液并回調pH值至6.9～7.2，然后進行透析、蒸發濃縮和冷凍干燥，得到石佛翠茶多糖。

2.根據權利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步驟(2)中，所述預處理的茶粉與磷酸緩沖液的質量體積比為1g∶30mL～40mL，所述復合酶占磷酸緩沖液的質量分數為0.004wt％～0.006wt％，所述磷酸緩沖液的pH值為4.5～5。

3.根據權利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步驟(4)中，蒸發濃縮直至濃縮液體積為步驟(2)所用磷酸緩沖液體積與步驟(3)所用水的體積總和的1/10；所述除蛋白需確保最終反應體系的總體積為步驟(2)所用磷酸緩沖液體積的1/3～1/4。

4.根據權利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步驟(3)中，所述鈍化的時間為30min～50min，所述離心的轉速為4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述離心的時間為10min～12min，所述水提時間為1h～2h，所述水的加入量按預處理的茶粉與水的質量體積比為1g∶10mL～20mL計。

5.根據權利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步驟(4)中，所述離心的轉速為4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述離心的時間為10min～12min，蒸發濃縮液與無水乙醇的體積比為1∶3～4，所述再次離心的轉速為4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述離心的時間為10min～12min，所述三氯乙酸溶液中三氯乙酸的質量分數為3％～5％。

6.根據權利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步驟(4)中，所述離心的轉速為4000r·min^-1～4500r·min^-1，所述離心的時間為10min～12min，所述透析是指將pH值回調后的第三上清液裝入分子截留量為8000Da～13000Da的透析袋中進行透析，每4h～6h更換一次水，共透析24h～48h，所述真空冷凍干燥的壓強為10Pa～15Pa，溫度為-40℃～-35℃，所述冷凍干燥的時間為36h～48h。

7.根據權利要求1所述的石佛翠茶多糖的提取方法，其特征在于，步驟(1)中，所述烘干的溫度為60℃～75℃，所述烘干的時間為4h～5h，間隔1h～1.5h翻面一次，所述茶粉體積與石油醚體積之比為1∶10～15；

所述脫脂過程中，所述浸泡攪拌的時間為8h～12h，重復所述浸泡攪拌、抽濾過程2次～4次；

所述脫色過程中，所述浸泡攪拌的時間為6h～8h，重復所述浸泡攪拌、抽濾過程2次～4次，直至茶粉無色；

和/或，步驟(1)中，所述石佛翠茶葉為石佛翠夏秋茶葉。

8.一種如權利要求1～7中任一項所述的石佛翠茶多糖的提取方法提取得到的石佛翠茶多糖。