[發明專利]lncRNACACF吸附miR-520b-3p在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用

有效

• 申請號: 202210582507.7
• 申請日: 2022-05-26
• 公開（公告）號: CN114958849B
• 公開（公告）日: 2023-10-27
• 發明（設計）人: 張豪;白國鋒;王希龍;廖偉莉;潘金春;袁曉龍
• 申請（專利權）人: 華南農業大學;廣東省實驗動物監測所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;C12Q1/66;C12Q1/6888;C12Q1/6851;G01N15/14;G01N1/30
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 張珍

本發明公開了lncRNACACF吸附miR?520b?3p在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用。本發明采用細胞生物學的方法第一次證實了長鏈非編碼RNA CACF在人臍靜脈內皮細胞中競爭性吸附miR?520b?3p，并通過Annexin V?FITC/PI技術以及miR?520b?3p和lncRNA CACF超表達載體共轉染回復實驗，證實了lncRNA CACF吸附miR?520b?3p促進人臍靜脈內皮細胞周期進程中的應用。

技術領域

本發明屬于細胞工程和基因工程技術領域，具體涉及lncRNA CACF吸附miR-520b-3p在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用。

背景技術

心肌梗死(Myocardial Infarction，MI)是一種嚴重危害人類健康的心血管疾病。促進MI后的血管新生能改善MI后的心臟功能。新生的血管是從已有的毛細血管或毛細血管后靜脈發展而來，主要包括血管內皮細胞的增殖、出芽和遷移。細胞的增殖是通過細胞周期(cell cycle)來完成的，細胞周期指的是從一次有絲分裂結束到下一次有絲分裂結束的全過程。細胞周期依次分為G1期、S期(DNA合成期)、G2期和M期(有絲分裂)四個時期。

長鏈非編碼RNA(Long Non-coding RNA，lncRNA)是一類長度超過200nt的非編碼RNA，可作為重要調節因子參與到包括MI在內的各種疾病的發生和/或發展中。研究表明，lncRNA可以通過競爭性吸附miRNA，抑制微小核糖核酸(microRNA，miRNA)對mRNA的降解作用，進而發揮其生理功能。lncRNA CACF(Cardiac autophagy contributory factor，暫命名)測序編號為lncRNA XLOC_083933在心肌梗死后促進人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)的增殖、凋亡和血管成型。但其對HUVECs細胞周期的調控尚沒有報道。

miRNA是一類內源性非編碼單鏈小分子RNA，長度約為22個核苷酸，可通過與信使核糖核酸(Messenger Ribonucleic Acid，mRNA)的3’非翻譯區(untranslated region，UTR)不同程度的互補配對，誘導靶基因mRNA降解或抑制翻譯，從而在轉錄后水平調控靶基因的表達。目前尚無關于miR-520b-3p對人臍靜脈內皮細胞周期調控的相關報道。

發明內容

為解決相關問題，本發明的首要目的在于提供lncRNA CACF在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用。

本發明的另一目的在于提供miR-520b-3p在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用。

本發明的再一目的在于提供lncRNA CACF吸附miR-520b-3p在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用。

為了實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案：

lncRNA CACF在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用，體外環境下，lncRNA CACF正調控人臍靜脈內皮細胞周期進程；通過調節lncRNA CACF的表達水平，可實現人臍靜脈內皮細胞周期進程調控；所述的lncRNA CACF如SEQ ID NO：1所示。

進一步地，增加外源性lncRNA CACF，S期和G2期細胞占比增加，人臍靜脈內皮細胞周期進程加快；抑制lncRNA CACF的表達，細胞周期阻滯在G1期，人臍靜脈內皮細胞周期進程阻滯。

進一步地，所述的lncRNA CACF通過競爭性吸附miR-520b-3p，實現人臍靜脈內皮細胞周期進程調控。

miR-520b-3p在調控人臍靜脈內皮細胞周期中的應用，體外環境下，miR-520b-3p負調控人臍靜脈內皮細胞周期進程；通過調節miR-520b-3p的表達水平，可實現人臍靜脈內皮細胞周期進程調控。