[發明專利]一種CpGODN佐劑及其在抗體生產中的應用

在審

• 申請號: 202210574422.4
• 申請日: 2022-05-24
• 公開（公告）號: CN114836416A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 繆連軍;劉宗文;潘紅;張磊;張志鵬;劉倩;朱桃花
• 申請（專利權）人: 安徽環球基因科技有限公司
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C07K16/06
• 代理公司: 合肥正則元起專利代理事務所(普通合伙) 34160
• 代理人: 胡玉

本發明涉及一種CpG ODN佐劑及其在抗體生產中的應用，屬于多克隆抗體生產技術領域。所述CpG ODN佐劑在抗體生產中的應用為按照CpGODN?1、CpG ODN?2、CpG ODN?3、CpG ODN?4、CpG ODN?5、CpG ODN?6、CpGODN?7、CpG ODN?8、CpG ODN?9和CpG ODN?10序列中的一種或幾種進行合成后，然后混合，再與陽離子脂質體試劑等體積混合，作為CpG ODN混合佐劑用于抗體生產。使用本發明提供的為CpG ODN混合佐劑，可將常規的動物免疫周期由10周縮短至4周。生產的多克隆抗體產品效價明顯高于對照組，抗體產量也比對照組高。

技術領域

本發明屬于多克隆抗體生產技術領域，具體地，涉及一種CpG ODN佐劑及其在抗體生產中的應用。

背景技術

多克隆抗體指用包含多種抗原決定簇的抗原免疫動物，可刺激機體多個B細胞克隆產生針對多種抗原表位的不同抗體，所獲得的免疫血清實際上是含有多種抗體的混合物。在體外診斷試劑中，免疫比濁法試劑可以使用單克隆抗體或多克隆抗體，使用單克隆抗體成本較高，因為只能識別有限表位，不能保證對樣本中靶蛋白的完全識別。因此，目前市場上免疫比濁試劑大都采用多克隆抗體。多克隆抗體成本較低，可以批量生產，但對生產周期、抗體效價、批間差異等都有著很高的要求。多克隆抗體一般制備流程為抗原制備、動物免疫、效價檢測、血清采集與處理，抗體純化。其中動物免疫主要是使用合適的佐劑配合抗原接種動物，按照一定的免疫方案進行多次接種，使其盡可能快速、高效、大量的產生特異性抗體。

CpG ODN佐劑是一種含有非甲基化胞嘧啶鳥嘌呤的脫氧核苷酸序列，可以增強抗原的加工遞呈，誘導體液免疫。CpG ODN通過激活TLR9信號，可以與B細胞抗原受體信號協同促進初始B細胞、已誘發B細胞和記憶性B細胞的激活，并進一步分化為分泌抗體分子的漿細胞。TLR9主要由漿細胞和B細胞表達，暴露于TLR9激動劑中的B淋巴細胞更容易被抗原激活以反映它們作為免疫增強劑的效用。一般來說，由于初始B細胞不具備表達TLR9的能力，所以其對于CpG ODN的激活作用并無響應，因此必須事先用抗原刺激初始B細胞以確保其被CpG ODN激活后可分化成漿細胞。CpG ODN能夠人工合成，可應用于多種抗原，以凍干粉保存，狀態穩定，便于運輸，為其作為免疫佐劑產業化提供了有力的基礎支持。

現有技術公開了CpG ODN佐劑在多種人類疫苗、動物疫苗中的具體序列、制備和應用方法，可以明顯增強疫苗的效果。而在多克隆抗體的生產過程中，選擇合適的CpG ODN佐劑，設計合理的方案，配合傳統的免疫技術，發揮其免疫增強劑的作用，使得多克隆抗體的生產的周期更短，抗體效價更高。

發明內容

本發明的目的在于提供一種CpG ODN佐劑及其在抗體生產中的應用，以解決背景技術中的問題。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：

一種CpG ODN佐劑，具體序列如表1所示。

表1