[發(fā)明專(zhuān)利]一種CpGODN佐劑及其在抗體生產(chǎn)中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210574422.4
• 申請(qǐng)日: 2022-05-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114836416A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-08-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 繆連軍;劉宗文;潘紅;張磊;張志鵬;劉倩;朱桃花
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 安徽環(huán)球基因科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/11
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/11;C07K16/06
• 代理公司: 合肥正則元起專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙) 34160
• 代理人: 胡玉

1.一種CpG ODN佐劑，其特征在于：由以下序列組成：CpG ODN-1為T(mén)GACTGTGAACGTTCGAGAAGA；CpG ODN-2為ATTCCTGCACGTTCGAGTCCATT；CpG ODN-3為CCTTCATTCCGTTCGGGTACATT；CpG ODN-4為T(mén)TTCACCTCGTTCGTTACCTGAC；CpG ODN-5為AACTGTAACCGTTCGTCCACTAC；CpG ODN-6為T(mén)TACAATCACGAACGTTCATCG；CpG ODN-7為AACTTCACGTTCGACTTTCTAGA；CpG ODN-8為ATCCATTCGTTCGAATCATACCTA；CpG ODN-9為AATTCTTCGTTCGATCGTTCGTAA；CpG ODN-10為T(mén)ACTCCCTCGTTCGATCGCCTCAGT。

2.一種CpG ODN佐劑在抗體生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于：合成權(quán)利要求1所述的CpG ODN佐劑中CpG ODN-1、CpG ODN-2、CpG ODN-3、CpG ODN-4、CpG ODN-5、CpG ODN-6、CpG ODN-7、CpG ODN-8、CpG ODN-9和CpG ODN-10序列中的一種或幾種，然后混合，再與陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑等體積混合，作為CpG ODN混合佐劑用于抗體生產(chǎn)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種CpG ODN佐劑在抗體生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一、抗原準(zhǔn)備；

步驟二、CpG ODN混合佐劑準(zhǔn)備：合成序列CpG ODN-1、CpG ODN-2、CpG ODN-3、CpG ODN-4、CpG ODN-5、CpG ODN-6、CpG ODN-7、CpG ODN-8、CpG ODN-9和CpG ODN-10中的一種或幾種，然后進(jìn)行混合，并與陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑等體積混合，靜置30min后，待用；

步驟三、免疫試驗(yàn)以及抗體提取。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種CpG ODN佐劑在抗體生產(chǎn)中的應(yīng)用，其特征在于：步驟三的具體操作如下：

i.使用弗氏完全佐劑進(jìn)行基礎(chǔ)免疫，3天后對(duì)動(dòng)物注射CpG ODN混合佐劑；

ii.7天后使用弗氏不完全佐劑進(jìn)行第一次加強(qiáng)免疫，同時(shí)給動(dòng)物注射CpG ODN混合佐劑；

iii.14天后使用步驟ii中的操作進(jìn)行第二次加強(qiáng)免疫；

iv.21天后使用步驟ii中的操作進(jìn)行第三次加強(qiáng)免疫；

v.28天后進(jìn)行血清終放采集，并檢測(cè)效價(jià)，抗體純化。