[發明專利]一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法

有效

• 申請號: 202210566660.0
• 申請日: 2022-05-24
• 公開（公告）號: CN114965768B
• 公開（公告）日: 2023-10-24
• 發明（設計）人: 紀玉哲;王貴金;李建勇;牛景月;吳維海;田野
• 申請（專利權）人: 河北平安健康集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/26;G01N30/34
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1.本發明涉及一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜法對該中藥組合物中的莫諾苷、馬錢苷和芒果苷三種成分進行含量測定，測定的色譜條件為：

第一步：色譜柱為C18柱，以乙腈為流動相A，以0.1%磷酸溶液（V/V）為流動相B，A+B=100%，進行梯度洗脫，洗脫程序為：0~30min，A7%，B93%，流速1.0ml/min； 30~60min，A7%→10%，B93%→90%，流速0.5ml/min；60~62min，A10%→90%，B90%→10%，流速1.0ml/min；62~72min， A90%，B10%，流速1.0ml/min；72~73min，A90%→7%，B10%→93%，流速1.0ml/min，檢測波長為：莫諾苷、馬錢苷的檢測波長為240nm，芒果苷的檢測波長為318nm；柱溫為35℃，進樣量10μl；

第二步：對照品溶液的制備：分別精密稱取莫諾苷、馬錢苷、芒果苷對照品適量，加80%甲醇制成每1mL含莫諾苷100μg、馬錢苷130μg、芒果苷48μg的混合對照品溶液；

第三步：供試品溶液制備：取該中藥組合物，研細，取1.0g，精密稱定，精密加入80%甲醇溶液25mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率20kHz）20分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用80%甲醇補足減失的重量，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液；

第四步：分別制備缺山萸肉藥材的制劑、缺知母藥材的制劑，再根據第三步分別制備缺山萸肉陰性對照溶液；缺知母陰性對照溶液；

第五步：方法學考察，所述方法學考察包括線性關系考察、專屬性試驗、精密度試驗、穩定性試驗、重復性試驗、加樣回收試驗、耐用性試驗，所述線性關系考察中的對照品溶液為：精密稱取莫諾苷、馬錢苷對照品適量，分別置于不同的25mL量瓶中，加80%甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為0.6mg/mL的莫諾苷對照品儲備液和濃度為0.6mg/mL的馬錢苷對照品儲備液；精密稱取芒果苷對照品適量，置于25mL量瓶中，加稀乙醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為0.6mg/mL的芒果苷對照品儲備液；分別精密吸取上述對照品儲備液適量置于10mL量瓶中，加80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別制成35.70、52.29、79.53、106.04、132.56、159.70μg/mL莫諾苷系列濃度溶液；43.14、64.39、96.10、128.14、160.17、192.98μg/mL馬錢苷系列濃度溶液和16.46、24.57、36.67、48.90、61.12、73.64μg/mL芒果苷系列濃度溶液，各進樣10μL，以各對照品的濃度為橫坐標，峰面積值為縱坐標，繪制標準曲線，進行線性回歸。

2.根據權利要求1所述的一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于：所述專屬性試驗為分別精密吸取混合對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10μl進樣，記錄色譜圖。

3.根據權利要求1所述的一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于：所述精密度試驗為精密吸取混合對照品溶液和供試品溶液，分別在所述第一步中的色譜條件下連續進樣6次，測定莫諾苷、馬錢苷、芒果苷的峰面積的RSD值。

4.根據權利要求1所述的一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于：所述穩定性試驗為精密吸取混合對照品溶液和供試品溶液，每隔一定時間測定峰面積，考察了24h內的穩定性，測莫諾苷、馬錢苷、芒果苷的峰面積的RSD值。

5.根據權利要求1所述的一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于：所述重復性實驗為精密稱取以高、中、低劑量9份樣品，分別按所述第二步中的方法制備供試品溶液，按所屬第一步中的色譜條件進樣測定。

6.根據權利要求1所述的一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于：所述加樣回收試驗為精密稱取已知含量的同一批樣品9份，按高、中、低比例精密加入一定量的對照品，按所述第三步中的方法制備供試品溶液，按所屬第一步中的色譜條件進樣測定。

7.根據權利要求1所述的一種中藥組合物的一測三評快速定量檢測方法，其特征在于：所述耐用性試驗為考察了同一品牌不同批號的色譜柱對檢測結果的影響。