[發明專利]青霉菌W21C371及其在制備彎孢霉菌素中的應用

有效

• 申請號: 202210564272.9
• 申請日: 2022-05-23
• 公開（公告）號: CN115044483B
• 公開（公告）日: 2023-09-05
• 發明（設計）人: 王鴻;范曄;應優敏;陳建偉;章華偉;魏斌;俞琰壘
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/08;C07D313/00;C12R1/80
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 李世玉

本發明公開一種青霉菌(Penicillium?sp.)W21C371及其在發酵制備彎孢霉菌素中的應用。本發明首次報道了利用該菌株發酵培養，高產率制備高純度彎孢霉菌素的方法，使得彎孢霉菌素產率達到3.87g/kg大米，純度達到98.34％；該制備方法具有發酵條件簡單、菌種易培養、工藝步驟少、生產周期短等優勢，具有工業化、規模化生產的潛力，為彎孢霉菌素的制備提供了新的途徑。

(一)技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及一種青霉菌(Penicillium?sp.)W21C371及其在微生物發酵法制備彎孢霉菌素中的應用，可為彎孢霉菌素的工業化生產提供新的菌株與方法。

(二)背景技術

苯二酚內酯類化合物是一類結構多樣的真菌聚酮類次級代謝產物，廣泛分布于旋鮑腔菌屬、彎孢霉屬、鐮刀菌屬、腐質霉屬、二孢屬、青霉屬和普可尼亞屬等真菌，其結構共性為具有間二羥基苯環-大環內酯環橋聯母核。根據苯環和大環內酯駢合位置的不同，苯二酚內酯類化合物又可分為二羥基苯甲酸內酯和二羥基苯乙酸內酯兩類，前者的苯環與內酯環的α、β為駢合，二后者的苯環與內酯環的β、γ位駢合。藥效藥理學研究表明，苯二酚內酯類化合物具有顯著的熱休克蛋白90(Heat?Shock?Protein?90,Hsp90)和激酶抑制活性，在抗腫瘤藥物研發領域展現出了良好的應用前景。此外，該類化合物還表現出了良好的受體拮抗、殺線蟲、免疫調節等活性，吸引了研究人員的廣泛關注。

彎孢霉菌素，分子式為C₁₆H₂₀O₅，相對分子質量292，熔點206℃，其化學結構式I如下所示：

彎孢霉菌素及其類似物是典型的二羥基苯乙酸內酯類化合物，主要由鏈格孢屬、曲霉屬、彎孢霉屬、青霉屬真菌產生，其結構特征為具有與間苯二酚駢合的12元內酯。彎孢霉菌素具有抗菌、抗腫瘤、乙酰膽堿酯酶抑制、抗炎、抗氧化、除草等活性。因此，綠色、環保、高效、便捷的彎孢霉菌素規模化制備方法，可為以彎孢霉菌素類化合物為先導的創新藥物研制提供原料。

截至目前，彎孢霉菌素的規模化制備方法鮮有報道。CN?110438193?A公開了一種多菌混合發酵制備彎孢霉菌素的方法。該專利利用一株高產脫氫彎孢霉菌素的曲霉屬真菌與一株半伏小薄孔菌混合發酵制備彎孢霉菌素。該方法首先需分別單獨培養兩株真菌制備種子液，然后再嚴格控制兩種子液接種比例，接種過程相對繁瑣，工藝較難控制。此外，由于采用混合菌發酵，發酵產物中干擾性代謝產物較多，增加后續目標產物分離純化的難度。

(三)發明內容

本發明的目的是針對現有技術存在的缺陷，另辟蹊徑，提供一株新菌株——青霉菌(Penicillium?sp.)W21C371及其在制備彎孢霉菌素中的應用，以海洋來源真菌為篩選對象，經過大量的創造性實驗，篩選得到菌株Penicillium?sp.W21C371，通過菌株的發酵培養和發酵產物的提取分離，以高產率獲得高純度彎孢霉菌素(curvularin)，解決了現有技術的缺陷。

為實現上述發明目的，本發明采用的技術方案是：

本發明提供了一種海洋來源真菌新菌株——青霉菌(Penicillium?sp.)W21C371，保藏在中國典型培養物保藏中心，保藏日期為2022年1月13日，保藏編號為CCTCC?NO：M2022063，保藏單位地址為中國，武漢，武漢大學，郵編430072。