[發(fā)明專利]一種脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210560315.6
• 申請(qǐng)日: 2022-05-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114686427B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱鳳閣;陳香美;蔡廣研;傅博;張歡平;陳欠欠
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院第一醫(yī)學(xué)中心
• 主分類號(hào): C12N5/0781
• 分類號(hào): C12N5/0781;G01N33/569;A61K35/17;A61P13/12
• 代理公司: 北京三友知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾;張德斌

1.一種脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞，其特征在于，所述細(xì)胞中CD1d、CD5和CD21/35抗體陽(yáng)性的調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞純度在94.6%以上。

2.一種制備權(quán)利要求1所述的脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

取脾臟細(xì)胞懸液，采用表面抗體CD1d、CD5和CD21/35標(biāo)記；

熒光激活細(xì)胞分選術(shù)分選表面抗體CD1d、CD5和CD21/35陽(yáng)性的細(xì)胞，即得到所述脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述方法還包括將離體的脾臟進(jìn)行破碎、過(guò)濾、重懸而獲得脾臟細(xì)胞懸液的過(guò)程。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述方法還包括對(duì)分選獲得的細(xì)胞進(jìn)行純度測(cè)定的過(guò)程；

所述純度測(cè)定的過(guò)程包括以下步驟：

應(yīng)用CD1d、CD5和CD21/35表面抗體再次標(biāo)記經(jīng)分選得到的細(xì)胞，之后通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定CD1d、CD5和CD21/35抗體陽(yáng)性的調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞的純度。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述脾臟細(xì)胞為小鼠脾臟細(xì)胞。

6.權(quán)利要求1所述的脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞在制備靶向定植于雙側(cè)腎臟的制劑中的應(yīng)用。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞來(lái)源于自發(fā)熒光的mT/mG小鼠。

8.權(quán)利要求1所述的脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞在制備用于腎臟保護(hù)的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述腎臟保護(hù)包括減輕梗阻側(cè)腎臟腎小管間質(zhì)纖維化程度或減輕梗阻側(cè)腎臟腎皮質(zhì)變薄程度。

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞為小鼠脾臟調(diào)節(jié)型B淋巴細(xì)胞。