[發明專利]金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜

在審

• 申請號: 202210556650.9
• 申請日: 2022-05-19
• 公開（公告）號: CN115184479A
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 潘燕;胡林水;陳智洋;吳明
• 申請（專利權）人: 浙江康恩貝制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 杭州仁杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 33297
• 代理人: 胡寅旭

1.金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備不同供試品溶液；

(2)制備對照品混合溶液：精密稱取葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、葒草苷、牡荊苷、槲皮素對照品適量，用體積百分含量為30％～100％甲醇溶液配制成每1mL分別含10～80μg葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、10～80μg葒草苷、5～50μg牡荊苷、5～50μg槲皮素的對照品混合溶液；

(3)采用HPLC分別對不同供試品溶液及對照品混合溶液進行進樣分析，記錄不同供試品溶液HPLC指紋圖譜及混合對照品溶液HPLC指紋圖譜，以其中1個批次的供試品溶液HPLC指紋圖譜作為參照圖譜，設置時間窗寬度設為0.1min，采用中位數矢量法計算，經多點校正、數據匹配，生成對照指紋圖譜(R)；

(4)通過比對對照品混合溶液HPLC指紋圖譜和對照指紋圖譜(R)中各色譜峰的出峰時間，確認有22個共有峰，并指認出：2號峰為葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、4號峰為葒草苷、8號峰為牡荊苷、17號峰為槲皮素；

(5)以葒草苷作為參照峰，利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，對不同批次供試品溶液HPLC指紋圖譜與對照指紋圖譜(R)進行相似度計算分析。

2.根據權利要求1所述的金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，步驟(1)中，所述供試品溶液通過以下方法制得：精密量取金蓮花口服液3～10mL于100mL容量瓶中，加入體積百分含量為30％～100％甲醇溶液50～100mL，超聲處理5～30min，超聲功率400W，超聲頻率40W，放冷至室溫，定容，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取10mL續濾液于25mL容量瓶中，加入體積百分含量為30％～100％甲醇溶液稀釋定容至刻度，搖勻，過0.45μm有機微孔濾膜。

3.根據權利要求2所述的金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述供試品溶液通過以下方法制得：精密量取供試品5mL于100mL量瓶中，加入甲醇80mL，超聲處理10min，超聲功率400W，超聲頻率40kHz，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續濾液10mL于25mL量瓶中，加體積百分含量為50％甲醇溶液至刻度，搖勻，過0.45μm有機微孔濾膜濾過。

4.根據權利要求1所述的金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，所述供試品溶液中的供試品為金蓮花口服液或提取濃縮液。

5.根據權利要求1所述的金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，其特征在于，步驟(2)中，所述混合對照品混合溶液通過以下方法制得：精密稱取葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、葒草苷、牡荊苷、槲皮素對照品適量，用體積百分含量為50％甲醇溶液配制成每1mL分別含50μg葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、60μg葒草苷、18μg牡荊苷、5μg槲皮素的對照品混合溶液。