[發明專利]金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜

在審

• 申請號: 202210556650.9
• 申請日: 2022-05-19
• 公開（公告）號: CN115184479A
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 潘燕;胡林水;陳智洋;吳明
• 申請（專利權）人: 浙江康恩貝制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 杭州仁杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 33297
• 代理人: 胡寅旭

本發明公開了金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：(1)制備不同供試品溶液；(2)制備混合對照品溶液；(3)采用HPLC進樣分析，生成對照指紋圖譜(R)；(4)確認有22個共有色譜峰，并指認出：2號峰為葒草素?2″?O?β?L?半乳糖苷、4號峰為葒草苷、8號峰為牡荊苷、17號峰為槲皮素；(4)利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統進行相似度分析。本發明穩定性高，準確性與重復性好，能較全面的反映金蓮花口服液的質量信息，可用于金蓮花口服液的生產過程監控和制劑質量的控制。

技術領域

本發明涉及中藥指紋圖譜建立技術領域，尤其是涉及金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜。

背景技術

金蓮花口服液是由金蓮花單味藥材組成的制劑，用于風熱邪毒襲肺，熱毒內盛引起的上呼吸道感染、咽炎、扁桃體炎。現收載于《中國藥典》2020年版一部。

藥品的質量是保證臨床用藥安全有效的前提，目前《中國藥典》中用來評價金蓮花口服液制劑質量的方法是以葒草苷為指標進行控制，但是金蓮花口服液成分復雜，僅靠單一成分的含量測量并不能對金蓮花口服液的質量進行整體描述與評價，難以有效反映金蓮花口服液的整體質量。

中藥指紋圖譜作為一種綜合的可量化的鑒定手段，其信息量大、特征性強、整體性、模糊性等特點能全面地反映中藥所含化學成分的種類和數量，目前已成為符合中藥特點的質量控制模式之一，并在中藥制劑質量控制上的應用愈加廣泛。

目前，國內外尚未見有關于金蓮花口服液指紋圖譜建立的專利及文獻報道。

發明內容

本發明是為了提供一種穩定性高，準確性與重復性好的金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，能較全面的反映金蓮花口服液的質量信息，可用于金蓮花口服液的生產過程監控和制劑質量的控制，從而保證產品質量均一穩定，保證臨床用藥的安全性和有效性。

本發明還提供了一種金蓮花口服液HPLC指紋圖譜。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：本發明的金蓮花口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，包括以下步驟：

(1)制備不同供試品溶液。

(2)制備對照品混合溶液：精密稱取葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、葒草苷、牡荊苷、槲皮素對照品適量，用體積百分含量為30％～100％甲醇溶液配制成每1mL分別含10～80μg葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、10～80μg葒草苷、5～50μg牡荊苷、5～50μg槲皮素的對照品混合溶液。(3)采用HPLC分別對不同供試品溶液及對照品混合溶液進行進樣分析，記錄不同供試品溶液HPLC指紋圖譜及混合對照品溶液HPLC指紋圖譜，以其中1個批次的供試品溶液HPLC指紋圖譜作為參照圖譜，設置時間窗寬度設為0.1min，采用中位數矢量法計算，經多點校正、數據匹配，生成對照指紋圖譜(R)。

(4)通過比對對照品混合溶液HPLC指紋圖譜和對照指紋圖譜(R)中各色譜峰的出峰時間，確認有22個共有峰，并指認出：2號峰為葒草素-2″-O-β-L-半乳糖苷、4號峰為葒草苷、8號峰為牡荊苷、17號峰為槲皮素。

(5)以葒草苷作為參照峰，利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，對不同批次供試品溶液HPLC指紋圖譜與對照指紋圖譜(R)進行相似度計算分析。本申請中采用的中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(2012版)；4號峰葒草苷分離度好，峰面積較大且保留時間適中，故以葒草苷為參照峰。

作為優選，步驟(1)中，所述供試品溶液通過以下方法制得：精密量取金蓮花口服液3～10mL于100mL容量瓶中，加入體積百分含量為30％～100％甲醇溶液50～100mL，超聲處理5～30min，超聲功率400W，超聲頻率40W，放冷至室溫，定容，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取10mL續濾液于25mL容量瓶中，加入體積百分含量為30％～100％甲醇溶液稀釋定容至刻度，搖勻，過0.45μm有機微孔濾膜。