[發(fā)明專利]一種用牛皮生產(chǎn)膠原三肽的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210554349.4
• 申請日: 2022-05-19
• 公開（公告）號: CN114805550B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張格;林冰瑩;吳偉;崔根;李江
• 申請（專利權(quán)）人: 山東恒鑫生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C07K5/083;C12P21/06
• 代理公司: 山東知圣律師事務(wù)所 37262
• 代理人: 郭雨濤

本發(fā)明提供了一種用牛皮生產(chǎn)膠原三肽的方法，是由以下步驟制得的：預(yù)處理、變性處理、激發(fā)處理、膠原三肽液，將膠原三肽液滅酶、離心，收集上清液，K15活性碳柱脫色脫味，噴霧干燥，得膠原三肽。本發(fā)明的方法可以徹底酶解膠原蛋白，酶解產(chǎn)物分子量小且集中，膠原三肽得率高，羥脯氨酸含量高，總氮含量高，灰分含量低，成品細(xì)膩，水溶性好，有利于規(guī)模化生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于活性物質(zhì)提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用牛皮生產(chǎn)膠原三肽的方法。

背景技術(shù)

膠原蛋白富含人體需要的甘氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸等膠原蛋白特征氨基酸。膠原蛋白是一種高分子功能性蛋白質(zhì)，它是皮膚的主要組成部分，占皮膚真皮層80％的比重，它在皮膚中構(gòu)成了一張細(xì)密的彈力網(wǎng)，牢固鎖住水分，支撐著皮膚。膠原蛋白是由三條肽鏈擰成的螺旋纖維狀蛋白質(zhì)，也是人體內(nèi)含量最豐富的蛋白質(zhì)，廣泛分布于結(jié)締組織、皮膚、骨骼、內(nèi)臟細(xì)胞間質(zhì)及肌腔、韌帶、鞏膜等部位，大約占人體總蛋白質(zhì)的30％以上，是人體細(xì)胞特別是肌膚細(xì)胞外基質(zhì)中重要組成部分。膠原蛋白是大分子蛋白質(zhì)，其分子量在300,000Da以上，不能被人體直接吸收。

膠原的最小單元是膠原三肽(Collagentripeptide)簡稱CTP，其結(jié)構(gòu)可以表示為(Gly-X-Y)，是一種在N端帶有甘氨酸的高純度的膠原三肽。膠原三肽具有多種生物活性，如促進(jìn)皮膚再生、骨骼生長、抗氧化、抗動脈粥樣硬化等。在應(yīng)用于皮膚表面時，具有良好的細(xì)胞黏結(jié)性、吸收性和生物相溶性，在化妝品中作為保濕劑和皮膚保護(hù)劑，可促進(jìn)上皮細(xì)胞形成，直接補充人體流失的膠原蛋白，延緩皮膚衰老，可用于祛皺、保濕和修復(fù)等。微量射線自動照相法研究表明，CTP具有約280Da的平均分子量。而目前市場上的絕大多數(shù)膠原肽，主要由30至100個氨基酸構(gòu)成多聚氨基酸平均分子量達(dá)3000-10000Da，其生物利用率有限。

動物皮因來源豐富、價格低廉而成為提取膠原的常用材料。牛皮作為肉食工業(yè)牛肉的加工副產(chǎn)物除部分用于制革工業(yè)外，其余有待開發(fā)和利用。現(xiàn)有的膠原三肽產(chǎn)率低、純度不高，嚴(yán)重制約了膠原三肽的深度開發(fā)和應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種可以徹底酶解膠原蛋白，酶解產(chǎn)物分子量小且集中，膠原三肽得率高，水溶性好的用牛皮生產(chǎn)膠原三肽的方法。

本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種用牛皮生產(chǎn)膠原三肽的方法，是由以下步驟制得的：

1)預(yù)處理：取鮮牛皮，清洗干凈，脫毛，切割成不大于4×4mm的小塊，加至質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3-7％的氯化鈉溶液中，常溫浸泡1h，控干水分，再加至0.1mol/L的NaOH溶液中，3-5℃條件下攪拌均勻，浸泡2-4d，水洗3-5次，得預(yù)處理牛皮；

所述的，牛皮與氯化鈉溶液、NaOH溶液的重量比為1：4-6：3-5。

牛皮先經(jīng)氯化鈉溶液常溫浸泡，去除牛皮上的部分脂肪、雜蛋白等雜質(zhì)；再經(jīng)NaOH溶液攪拌處理，去除牛皮中非膠原蛋白的同時，還可以松散牛皮纖維，改善牛皮的組織結(jié)構(gòu)，顯著提高其滲透性，縮短提取時間。

2)變性處理：將預(yù)處理牛皮和水按照1：5的質(zhì)量比混合，0.8-1.0MPa條件下，100℃煮沸20-30min，降溫至50-60℃，雙層紗布濾去殘渣，得變性牛皮；

高溫高壓條件下進(jìn)行變性處理，使牛皮中的膠原蛋白分子迅速解螺旋并發(fā)生斷裂，破壞其穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。

3)激發(fā)處理：將變性牛皮加至激發(fā)液中，35-45℃條件下浸泡30-50min，升溫至80-85℃，保持3-5min，自然冷卻至室溫，水洗，控干水分，烘干，粉碎后過80-100目篩，得激發(fā)牛皮粉；

所述的，變性牛皮與激發(fā)液的重量比為1：4-6。

所述的，激發(fā)液是由以下重量份的原料制得的：L-精氨酸2-4份、水溶性殼聚糖3-5份、硫酸鈉5-7份、三氯蔗糖2份、水100份。