[發(fā)明專利]一株產(chǎn)蛋白酶的蠟樣芽胞桿菌及其在大曲中的應(yīng)用

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• 申請日: 2022-05-18
• 公開（公告）號: CN114874942A
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李建龍;李超偉;劉書亮;侯曉艷;胡凱弟;李琴;李宜洹;郭家馨;姚尚宇
• 申請（專利權(quán)）人: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12G3/02;C12R1/085
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明提供了一株產(chǎn)蛋白酶的蠟樣芽胞桿菌Bacillus cereus SAU?Q1及其應(yīng)用，屬微生物技術(shù)領(lǐng)域。從白酒大曲中分離得到一株產(chǎn)蛋白酶的蠟樣芽胞桿菌，保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏地點為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院，保藏號為CGMCC No.24721，保藏日期為2022年4月19日。菌株SAU?Q1在固體培養(yǎng)基產(chǎn)蛋白酶的活力為1733.16 U/g；酶蠟樣芽胞桿菌SAU?Q1分別在90℃、pH 4.0和16%氯化鈉濃度下菌體存活率依然可以達(dá)到71.31%、30.21%、22.14%。將菌株SAU?Q1應(yīng)用于白酒大曲的強(qiáng)化實驗，試驗組蛋白酶活提高了10%，試驗組白酒大曲的的曲香味更濃。菌株SAU?Q1在白酒大曲、食醋醋曲中具有良好的應(yīng)用潛力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株從白酒大曲中分離得到的產(chǎn)蛋白酶的蠟樣芽胞桿菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

白酒是糧食在酒曲和多種菌共同作用下糖化發(fā)酵，再加上后期的蒸餾、貯存等工藝流程，而成的蒸餾酒；酒曲中，微生物種類含量豐富，不同的微生物可通過不同的生化作用產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，從而影響白酒的質(zhì)量與口感；蛋白酶在白酒釀造的過程中，起到分解原料中蛋白質(zhì)的作用；其分解作用機(jī)理主要有3種：一、大分子蛋白質(zhì)直接降解為小分子氨基酸，生成的氨基酸可為酵母生長代謝所利用，同時還可為其它生長節(jié)約能源；二、將原料的殼水解掉，使其裸露出來，待微生物利用，從而提高白酒產(chǎn)量；三、間接使酒中富含獨特的香味，蛋白酶催化了蛋白質(zhì)的分解，分解出氨基酸不僅參與了美拉德反應(yīng)，產(chǎn)生了吡嗪類、呋喃類等一系列具有特殊香味的物質(zhì)，同時在微生物和酶的催化下也能產(chǎn)生香味物質(zhì)。

在白酒釀造過程中，微生物的參與及其重要，其中芽孢桿菌是一類十分重要的產(chǎn)蛋白酶的菌屬，其產(chǎn)蛋白酶能力極強(qiáng)；不僅如此，這類菌屬能夠擁有良好的環(huán)境耐受性，能夠承受較高的酒精濃度；朱國星等從高溫大曲中篩選出來的6株高產(chǎn)蛋白酶的菌屬皆為芽孢桿菌；王婧等以醬香大曲為樣品，從中分離得到的1株高蛋白酶的菌屬，亦為芽孢桿菌；因而在大曲中主產(chǎn)蛋白酶的菌屬應(yīng)為芽孢桿菌；專利CN201510180738.5公開了產(chǎn)蛋白酶的芽孢桿菌，經(jīng)過優(yōu)化后蛋白酶活力為294.44U/mL；發(fā)明專利CN202111620797.1公開了一株高產(chǎn)蛋白酶的解淀粉芽孢桿菌，蛋白酶活力達(dá)1390.6 U/mL；王婧從醬香型大曲分離得到地衣芽孢桿菌FBKL1.0199，實驗室條件下中性蛋白酶達(dá)3925.80 U/g；本發(fā)明專利公開的蠟樣芽孢桿菌篩選過程蛋白酶活力達(dá)1733.16 U/g，同時本發(fā)明專利公開的蠟樣芽孢桿菌應(yīng)用于大曲發(fā)酵試驗，檢測大曲中蛋白酶活力較高，蠟樣芽孢桿菌同地衣芽孢桿菌不同屬，特性差異較大；由于芽孢桿菌能形成芽孢，在自然環(huán)境中的抵抗力強(qiáng)于其他微生物（耐高溫、耐低水分等），菌株SAU-Q1在白酒大曲、食醋大曲中的應(yīng)用具有巨大的潛力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明主要目的是從白酒大曲中篩選得到一株產(chǎn)蛋白酶蠟樣芽孢桿菌并對其應(yīng)用進(jìn)行探索，本發(fā)明極大的豐富了白酒大曲發(fā)酵中的產(chǎn)酶菌株資源。

本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)。

本發(fā)明提供一株產(chǎn)蛋白酶蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus SAU-Q1，已于2022年4月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地點為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院，保藏號為CGMCC No. 24721。

所述的蠟樣芽孢桿菌分離于白酒大曲，經(jīng)初篩、復(fù)篩、純化后得到純菌，具有較強(qiáng)的產(chǎn)蛋白酶能力。

所述蠟樣芽孢桿菌SAU-Q1培養(yǎng)特征為：表面粗糙平整而并不透明，顏色為污白色，邊緣顏色為乳白色，單菌落形狀接近為圓形，表面也并無光澤，質(zhì)地松軟。

所述蠟樣芽孢桿菌SAU-Q1在顯微鏡下的菌體形態(tài)特征為：橢圓形或近圓形，革蘭氏陽性細(xì)菌。

所述蠟樣芽孢桿菌SAU-Q1耐受性試驗表明：SAU-Q1耐受在80℃、pH 4.0、16%的氯化鈉下都可以正常生長。