[發明專利]富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法及蛋雞養殖方法

在審

• 申請號: 202210536324.1
• 申請日: 2022-05-17
• 公開（公告）號: CN114965760A
• 公開（公告）日: 2022-08-30
• 發明（設計）人: 孫桂菊;陸怡霏
• 申請（專利權）人: 南京怡然生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/64
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

1.一種富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法，其特征在于，所述富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法包括：給成人提供兩種雞蛋；對照組為喂豆油飼料的雞蛋，SO-蛋；干預組為喂毛棕櫚油飼料的雞蛋，CPO-蛋；對照組60例，干預組60例；每個成年人每天均有一種雞蛋作為補充餐，干預期間告知監護人不要補充維生素A，干預時間為兩個月。

2.如權利要求1所述的富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法，其特征在于，所述富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法包括以下步驟：

步驟一，進行樣品采集；

步驟二，進行健康影響分析；

步驟三，進行統計分析。

3.如權利要求2所述的富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法，其特征在于，步驟一中，所述樣品采集，包括：

(1)膳食調查：在干預前采用三天24小時膳食調查法，通過詢問以及稱重的方式調查干預前三日的食物種類和數量，以及參與者的攝入量；每兩周記錄一次富含維生素A食物的攝入頻率；

(2)血樣采集：在試驗開始前采集受試者的血樣，記錄基線值；五個月結束時采集兩份血樣；采集空腹靜脈血6ml，在室內陰暗處保存30min；將1500×g的標本離心15min，分離出血清，分離后應在-20℃冰箱保存；

(3)腸道微生物區系：干預前及干預后收集排泄物，兩次收集排泄物存放在液氮罐中；采用Chiaamp Fast DNA糞便迷你試劑盒提取糞便細菌基因組DNA，用1％瓊脂糖凝膠電泳檢測，根據細菌基因組的完整性和濃度，選擇符合要求的標本保存。

4.如權利要求2所述的富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法，其特征在于，步驟二中，所述健康影響分析，包括：

(1)血清視黃醇和視黃醇酯的濃度：用反相高效液相色譜法HPLC測定血清視黃醇和視黃醇酯的濃度；

(2)血清生化指標：用診斷試劑和全自動生化分析儀檢測總膽固醇TC、甘油三酯TG、低密度脂蛋白膽固醇LDL-C和高密度脂蛋白膽固醇HDL-C；酶比色法測定TC和TG，直接清除法測定LDL-C和HDL-C；

(3)血清脂肪酸：用Folch法提取血清總脂，經乙酰氯-甲醇法甲酯化后，用氣相色譜-質譜聯用儀對血清中37種脂肪酸進行定量分析；

(4)腸道微生物群16S rRNA V3區的高通量測序：提取糞便中微生物的總DNA，用聚合酶鏈反應PCR擴增腸道微生物群16S rRNA V3區，用離子激流PGM法測序。

5.如權利要求4所述的富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法，其特征在于，步驟(1)中，所述血清視黃醇和視黃醇酯均包括基線和1,2鉬。

6.如權利要求2所述的富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法，其特征在于，步驟三中，所述統計分析，包括：

所有的實驗和測量進行一式三份，數據使用單因素方差分析ANOVA進行分析，數據以P0.05的置信度表示。

7.一種應用如權利要求1～6任意一項所述的富含類胡蘿卜素雞蛋對健康影響測定方法的蛋雞養殖方法，其特征在于，所述蛋雞養殖方法包括以下步驟：

第一步，選用180日齡、體重、產蛋率相近的海蘭褐蛋雞；

第二步，進行飼料的配置；

第三步，進行飼養管理。

8.如權利要求7所述的蛋雞養殖方法，其特征在于，第二步中，所述飼料的配置，包括：

對照組添加3％大豆油，實驗組添加3％CPO，所述飼料用量如下：

基礎日糧：農場自產飼料，無多余油脂，用于為實驗組配制飼料；

對照組：基礎飼料+3％大豆油；

3％CPO組：基礎飼料+3％CPO；

根據《家禽營養需要》和《雞飼養標準》制備玉米豆粕粉基礎飼料。