[發明專利]一種全蝎藥材及其配方顆粒UPLC特征圖譜的構建方法及應用

有效

• 申請號: 202210533619.3
• 申請日: 2022-05-17
• 公開（公告）號: CN114894934B
• 公開（公告）日: 2023-09-22
• 發明（設計）人: 顧楊欣;陳盛君;李松;祝倩倩;王協和;張鈺萍;鄭譚
• 申請（專利權）人: 江陰天江藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/74
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 陸濤

本發明公開了一種全蝎藥材及其配方顆粒UPLC特征圖譜的構建方法，包括1)取全蝎藥材或其配方顆粒中一種，處理后加入溶劑進行提取制成供試品溶液；2)取酪氨酸、色氨酸，加入溶劑制成對照品溶液；3)取全蝎對照藥材，加入溶劑進行提取制成對照藥材溶液；4)將供試品溶液、對照品溶液與對照藥材溶液分別注入液相色譜儀，根據創建的色譜條件，獲得特征圖譜；5)通過建立的UPLC特征圖譜來檢測全蝎藥材及其配方顆粒的質量。本發明提供更加全面、簡單、快捷、有效的全蝎藥材及其配方顆粒的質量控制方法，為全蝎藥材質量的提高和配方顆粒的產業化提供更有力保障。

技術領域

本發明涉及中藥領域，尤其涉及一種全蝎藥材及其配方顆粒UPLC特征圖譜的構建方法及應用。

背景技術

全蝎為鉗蝎科動物東亞鉗蝎Buthus?martensii?Karsch的干燥體。味辛，性平。有毒，歸肝經。具有息風鎮痙，通絡止痛，攻毒散結之效。用于肝風內動，痙攣抽搐，小兒驚風，半身不遂，破傷風，風濕頑痹，偏正頭痛，瘡瘍，瘰疬。

全蝎的主要成分為：蛋白質類、氨基酸類、脂肪油類、多糖和微量元素等。現代藥理作用與臨床研究表明，全蝎在抗哮喘、抗凝、抗血栓、促纖溶、鎮痛、抗癲癇、抗腫瘤，治療支氣管哮喘、白血病、扁桃體炎等方面都有較好的效果。臨床常與蜈蚣配對使用，制成散劑或膏劑用于治療各種瘡瘍腫痛。

中藥配方顆粒是由單味中藥飲片經水提、濃縮、干燥、制粒而成，是飲片改革的一種新形式，相比于傳統飲片湯劑具有方便攜帶，使用簡單的特性，能夠滿足現代快節奏工作與生活的要求。近年來，中藥配方顆粒快速發展，多個中藥品種的配方顆粒國家標準相繼出臺，為規范中藥配方顆粒的生產，推動中藥現代化做出了巨大貢獻。全蝎配方顆粒是全蝎飲片經過現代工藝提取、濃縮、干燥、制粒而成，保留了全蝎的臨床效果，同時兼顧了使用的便攜性。

關于全蝎的質量控制手段目前已有部分報道。張政等人采用高效毛細管蛋白電泳法對全蝎酶解液中蛋白類成分(10kDa)進行電泳分析，初步建立了以25個峰為共有峰的指紋圖譜，10批次全蝎藥材相似度均在0.999以上。王聰聰在藥典基礎上研究道地產區山東全蝎藥材質量評價，通過建立灰色關聯度法、紅外光譜、蛋白質聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)指紋圖譜、RAPD技術以及蝎毒指紋圖譜研究，全面評價5個不同產地10批次全蝎藥材質量。通過聚類分析，均顯示山東濟南千佛山產全蝎質量優于其他產區。

劉凱娜等人利用RP-HPLC法測定全蝎中甘氨酸、精氨酸、L-脯氨酸、亮氨酸含量，采用酸水解法制備游離氨基酸樣品溶液，結果顯示以上4種氨基酸溶液穩定，不易被酸氧化破壞，建議規定含氨基酸以甘氨酸、精氨酸、L-脯氨酸、亮氨酸的總量計不得少于15.0％。鄭曉媚以高效液相色譜-蒸發光散射檢測器(HPLC-ELSD)法測定全蝎中未衍生化牛磺酸含量，4批全蝎牛磺酸含量為0.81％-2.02％。

全蝎現行法定質量標準收錄于《中國藥典》2020年版一部，主要由性狀、顯微鑒別、水分、灰分、黃曲霉毒素檢查項和浸出物組成。這些檢測項目在一定程度上能反映全蝎藥材的質量，但內容相對簡單，質量控制效果有限。

市場上的全蝎原主要來源于野生，使用量大，野生資源消耗嚴重，現用量逐年攀升，市場供不應求，已逐漸轉為家養，價格也一路攀升。作為價值較高的藥材，全蝎在市場上存在摻偽現象，例如摻蛋清、水泥、淀粉等，藥材質量參差不齊，給全蝎的藥品質量和市場經營管理帶來極大挑戰，亟需開展進一步的研究豐富與全蝎質量相關的檢測項目，從而完善質量標準，保障用藥安全。

現有文獻資料中，多將全蝎樣品進行酸解，并采用柱前衍生HPLC法測定全蝎中氨基酸類成分，但該方法為水解之后樣品，呈現檢測結果與原樣品存在一定偏離，不能有效區別不同動物藥，且操作步驟繁瑣，對操作人員及儀器要求均較苛刻。此外還有毛細管電泳法，亦存在較多缺點：1、毛細管柱內徑小，蛋白質易吸附堵塞；2、與HPLC相比，操作復雜，重現性較差；3、反應條件較為苛刻，如蛋白電泳的方向會因pH值的改變而改變。因此，亟需開發新的方法對全蝎藥材及其配方顆粒進行質量控制。

發明內容