[發明專利]一種能夠穩定傳代的脊髓膠質瘤組織塊及其凍存和復蘇方法有效
| 申請號： | 202210529969.2 | 申請日： | 2022-05-16 |
| 公開（公告）號： | CN114634912B | 公開（公告）日： | 2022-08-26 |
| 發明（設計）人： | 柴睿超;王永志;龐波;賈文清;安崧源;張耀武 | 申請（專利權）人： | 北京市神經外科研究所 |
| 主分類號： | C12N5/09 | 分類號： | C12N5/09;C12N5/079;C12Q1/02;A01N1/02;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京英創嘉友知識產權代理事務所(普通合伙) 11447 | 代理人： | 耿超 |
| 地址： | 100070 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 能夠 穩定 傳代 脊髓 膠質 組織 及其 復蘇 方法 | ||
1.一種分離的并且能夠連續穩定傳代培養的脊髓膠質瘤組織塊，其特征在于，所述脊髓膠質瘤組織塊的保藏編號為CGMCC No.23030。
2.根據權利要求1所述的脊髓膠質瘤組織塊，其中，所述脊髓膠質瘤組織塊能夠在實驗動物體內連續穩定地傳代培養。
3.根據權利要求2所述的脊髓膠質瘤組織塊，其中，所述實驗動物為大鼠或小鼠。
4.權利要求1~3中任意一項所述脊髓膠質瘤組織塊的凍存方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：
S1、利用磷酸鹽緩沖液清洗待凍存的脊髓膠質瘤組織；
S2、將清洗后的脊髓膠質瘤組織剪成組織塊，并使用磷酸鹽緩沖液再次沖洗所述組織塊；
S3、向沖洗后的組織塊中加入預冷的凍存液，重懸所述組織塊，然后分裝至凍存管中；
S4、將步驟S3獲得的裝有組織塊的凍存管依次進行：3-5℃冷藏3-5h，15-25℃冷藏5-7h，零下70~零下90℃冷凍7-9h，最后在液氮中冷凍保存。
5.根據權利要求4所述的方法，其中，步驟S3中所述預冷的凍存液的體積為所述組織塊體積的10-20倍。
6.根據權利要求4所述的方法，其中，所述組織塊的長度為1-3mm，截面積為1-6平方毫米。
7.根據權利要求4所述的方法，其中，步驟S3中所述預冷的凍存液包括含8-12體積%的二甲基亞砜的胎牛血清凍存液。
8.一種脊髓膠質瘤組織塊的復蘇方法，其特征在于，該方法包括：
將權利要求4~7中任意一項所述的方法凍存得到的脊髓膠質瘤組織塊從液氮中取出，放置在35-38℃的水浴中解凍至融化，然后加入生理鹽水混勻，再離心去掉上清液，得到復蘇后的脊髓膠質瘤組織塊。
9.權利要求1~3中任意一項所述的脊髓膠質瘤組織塊在篩選治療脊髓膠質瘤藥物中的用途。
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