[發明專利]導致眼白化病I型的GPR143基因突變體、多肽、試劑盒、構建體、重組細胞及應用

有效

• 申請號: 202210525325.6
• 申請日: 2022-05-16
• 公開（公告）號: CN114605524B
• 公開（公告）日: 2022-07-26
• 發明（設計）人: 豐岱榮;張亞寧;閆曉娜;劉紅彥;黃佳
• 申請（專利權）人: 濰坊醫學院附屬醫院;河南省人民醫院
• 主分類號: C07K14/72
• 分類號: C07K14/72;C12N15/12;C12Q1/6883;G01N33/68;C12N15/85;C12N15/62;C12N5/10
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

本發明涉及一種導致眼白化病I型的GPR143基因突變體、多肽、試劑盒、構建體、重組細胞及應用，屬于生物基因工程技術領域。本發明所述GPR143基因突變體為GPR143基因第8號外顯子的908位核苷酸發生G→T突變；所述多肽具有p.G303V突變；所述試劑盒能夠用于篩選易患眼白化病I型的生物樣品；所述核酸構建體含有GPR143基因突變體；所述重組細胞由所述含有GPR143基因突變體的核酸構建體轉染受體細胞獲得，可以表達帶有p.G303V突變的GPR143多肽。本發明可以用于眼白化病I型的分子遺傳學診斷，為GPR143基因突變所致眼白化病I型患者家系的產前基因診斷提供依據。

技術領域

本發明涉及生物基因工程技術領域，具體涉及一種導致眼白化病I型的GPR143基因突變體、多肽、試劑盒、構建體、重組細胞及應用。

背景技術

眼白化病I型（Ocular albinism type 1，OA1）是最常見的眼白化病形式，是一種X連鎖遺傳病（MIM 300500），患病率約為1/60000。OA1患者多為男性，臨床表現為視力嚴重下降、眼球震顫、屈光不正、虹膜半透明、眼底色素沉著減退、黃斑發育不全，以及立體視覺喪失；大多數OA1患者有明顯的虹膜和視網膜色素缺失的表現，與單純的先天性運動性眼球震顫患者不同，但由于虹膜和視網膜色素減退在亞洲人中并不明顯，OA1很容易被誤診為其他先天性眼病，如先天性眼球震顫。女性攜帶者通常沒有臨床癥狀，但眼底可見斑點或斑片狀色素缺失。

OA1的發生是由于G蛋白偶聯受體143（GPR143）基因突變導致。GPR143基因（MIM300808）定位于Xp22.2，全長40.5 kb，包含9個外顯子，mRNA轉錄本1645 bp（NM_000273），編碼由404個氨基酸殘基組成的GPR143蛋白，包含7個假定的跨膜結構域。GPR143為G蛋白偶聯受體（GPCR），參與質膜上的信號轉導，與其它GPCRs在細胞膜表達不同，GPR143只在表皮黑色素細胞和視網膜色素上皮細胞內的溶酶體和黑素體膜表達，對黑素體的發育和成熟有重要作用。GPR143基因突變導致功能喪失進而影響黑色素合成，并導致黑素體形成擴大的異常黑素體，而不是多個成熟黑素體融合。

GPR143作為眼白化病的致病基因之一，其致病突變較為罕見，到目前為止，國內外共發現203個致病突變位點，以點突變導致的錯義突變和無義突變為主，位于GPR143基因的9個外顯子內，影響GPR143編碼蛋白的功能。然而，由于目前研究的局限性，對于GPR143基因中新的變異，缺乏有效的致病性評價方法，阻礙了分子遺傳學診斷的建立和后續產前診斷的進行。因此，明確眼白化病I相關GPR143基因中的新發變異及其致病性，為明確患者的分子遺傳學診斷、指導患者的精準治療及其避免該家系的再生育風險有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種導致眼白化病I型的GPR143基因突變體、多肽、試劑盒、構建體、重組細胞及應用。本發明確定了GPR143基因的新突變體，新突變體與眼白化病I型的發病密切相關，通過檢測該新突變體在生物樣品中是否存在，可以有效地檢測生物樣品是否因此患眼白化病I型，明確患者的分子遺傳學診斷、指導患者的精準治療及其避免該家系的再生育風險。

本發明提供了一種GPR143基因突變體，所述GPR143基因突變體的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

本發明還提供了上述技術方案所述的GPR143基因突變體編碼的多肽，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

本發明還提供了檢測上述技術方案所述GPR143基因突變體或上述技術方案所述GPR143基因突變體編碼的多肽的試劑在制備眼白化病I型分子遺傳學診斷試劑盒或產前基因診斷試劑盒或易患眼白化病I型生物樣品篩選試劑盒中的應用；所述試劑含有檢測GPR143基因第908位核苷酸突變G→T的探針。