[發(fā)明專利]一種FTO rs1421085 TC點(diǎn)突變小鼠模型及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210516559.4
• 申請(qǐng)日: 2022-05-12
• 公開（公告）號(hào): CN114836476A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 寧光;王計(jì)秋;劉瑞欣;洪潔;張織茵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院;上海市內(nèi)分泌代謝病研究所
• 主分類號(hào): C12N15/90
• 分類號(hào): C12N15/90;C12N15/89;C12N15/12;A01K67/027
• 代理公司: 上海泰能知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31233
• 代理人: 黃志達(dá)

本發(fā)明涉及一種FTO rs1421085TC點(diǎn)突變小鼠模型及其應(yīng)用，本發(fā)明構(gòu)建的FTOrs1421085TC點(diǎn)突變小鼠模型為在篩選或制備抵抗肥胖藥物提供了有效的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，具有較好的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于動(dòng)物模型領(lǐng)域，特別涉及一種FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

隨著經(jīng)濟(jì)的飛速發(fā)展與物質(zhì)供給水平的提高，過剩的營養(yǎng)攝入與日趨減少的體力活動(dòng)導(dǎo)致的能量穩(wěn)態(tài)失衡成為人群整體性體重增加(體重分布曲線右移)的主要原因。近年來科技發(fā)展的進(jìn)步也使我們對(duì)肥胖及代謝性疾病的了解更加深入，肥胖的危害性廣為人知，人們對(duì)于飲食、運(yùn)動(dòng)和體重的重視程度日益提升，旨在減少卡路里攝入并增加能量消耗的生活方式和行為干預(yù)(如代謝性手術(shù)、輕斷食等)雖有一定效果，但功效有限；與此同時(shí)，體內(nèi)的各項(xiàng)激素參與的代謝調(diào)控系統(tǒng)及神經(jīng)化學(xué)適應(yīng)機(jī)制共同參與的機(jī)體防御機(jī)制導(dǎo)致了體重“易增難減”和減重后反彈等情況好發(fā)，更增加了肥胖治療的難度。基于此，肥胖遺傳學(xué)相關(guān)研究成為疾病早期防控與治療的突破口。來自雙胞胎和收養(yǎng)兒童相關(guān)的觀察性研究發(fā)現(xiàn)，BMI 的可遺傳性約為40–70％。瘦素受體(leptinreceptor)、黑素皮質(zhì)素受體(melanocortin receptor) 等基因上突變位點(diǎn)與肥胖發(fā)生間關(guān)聯(lián)(單基因性肥胖，monogenic obesity)的建立為肥胖遺傳學(xué)研究帶來了曙光。雖然僅從遺傳學(xué)角度并無法完全解釋近30年全球范圍內(nèi)肥胖人群的快速擴(kuò)張，但或許可以解釋在相同環(huán)境下個(gè)體間出現(xiàn)體重差異的原因，即，個(gè)體在整體人群體重曲線的相對(duì)位置主要是由遺傳因素決定的，無論是在社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展較低水平或較高水平；同時(shí)肥胖易感基因的發(fā)現(xiàn)可以加深我們對(duì)于機(jī)體體重調(diào)節(jié)和脂肪分布差異的病理生理機(jī)制的了解，為肥胖的治療和預(yù)防提供新思路。雖然肥胖的發(fā)生是遺傳、環(huán)境和社會(huì)心理等多因素共同作用的結(jié)果，但遺傳學(xué)因素因其特有的不可調(diào)控性、外顯率波動(dòng)范圍大且易受環(huán)境因素影響等問題，逐漸成為肥胖研究領(lǐng)域的難點(diǎn)。肥胖遺傳學(xué)研究在肥胖發(fā)病、精準(zhǔn)治療、預(yù)防預(yù)判等方面的意義顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型及其應(yīng)用。

本發(fā)明的一種FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型在研究肥胖疾病中的應(yīng)用。

所述應(yīng)用包括但不限于藥物篩選、診斷靶標(biāo)發(fā)掘。

本發(fā)明的一種FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型在篩選或制備抵抗肥胖藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的一種FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型在篩選或制備抵抗高脂誘導(dǎo)的肥胖藥物中的應(yīng)用。

所述小鼠模型為基于CRISPR/Cas的FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型、基于ES打靶的FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型、棕色脂肪條件性FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型中的一種或幾種。

所述基于CRISPR/Cas的FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型的構(gòu)建方法為：構(gòu)建包含 rs1421085的供體基因序列，并在體外將其與Cas9 mRNA,sgRNA一起通過顯微注射的方式導(dǎo)入受精卵內(nèi)，隨后注射至代孕雌性小鼠，鑒定基因型，得到FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型。

所述基于ES打靶的FTO rs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型的構(gòu)建方法為：構(gòu)建包含rs1421085的供體基因序列，在小鼠胚胎干細(xì)胞ES細(xì)胞中進(jìn)行DNA同源重組后，將ES細(xì)胞重新注射到囊胚腔中形成嵌合胚胎，在假孕雌性小鼠體內(nèi)發(fā)育，鑒定基因型，得到FTOrs1421085 T＞C點(diǎn)突變小鼠模型。