[發明專利]一種FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型及其應用

在審

• 申請號: 202210516559.4
• 申請日: 2022-05-12
• 公開（公告）號: CN114836476A
• 公開（公告）日: 2022-08-02
• 發明（設計）人: 寧光;王計秋;劉瑞欣;洪潔;張織茵
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院;上海市內分泌代謝病研究所
• 主分類號: C12N15/90
• 分類號: C12N15/90;C12N15/89;C12N15/12;A01K67/027
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所(普通合伙) 31233
• 代理人: 黃志達

1.一種FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型在研究肥胖疾病中的應用。

2.一種FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型在篩選或制備抵抗肥胖藥物中的應用。

3.根據權利要求2所述應用，其特征在于，所述FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型在篩選或制備抵抗高脂誘導的肥胖藥物中的應用。

4.根據權利要求1-2任一所述的應用，其特征在于，所述小鼠模型為基于CRISPR/Cas的FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型、基于ES打靶的FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型、棕色脂肪條件性FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型中的一種或幾種。

5.根據權利要求1所述小鼠模型，其特征在于，所述基于CRISPR/Cas的FTO rs1421085TC點突變小鼠模型的構建方法為：構建包含rs1421085的供體基因序列，并在體外將其與Cas9 mRNA,sgRNA一起通過顯微注射的方式導入受精卵內，隨后注射至代孕雌性小鼠，鑒定基因型，得到FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型。

6.根據權利要求1所述小鼠模型，其特征在于，所述基于ES打靶的FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型的構建方法為：構建包含rs1421085的供體基因序列，在小鼠胚胎干細胞ES細胞中進行DNA同源重組后，將ES細胞重新注射到囊胚腔中形成嵌合胚胎，在假孕雌性小鼠體內發育，鑒定基因型，得到FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型。

7.根據權利要求1所述小鼠模型，其特征在于，所述棕色脂肪條件性FTO rs1421085 TC點突變小鼠模型的構建方法：選擇插入位點；在靶向載體中，1號內含子包含該SNPrs1421085的部分區域被反向克隆到2號外顯子的上游；該區域側翼分別為loxP和lox2272位點；C57BL/6品系小鼠的ES細胞將作為靶向載體插入的目標細胞。