[發(fā)明專利]一種用于菌糠飼料化的菌劑及制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202210516032.1
• 申請日: 2022-05-12
• 公開（公告）號: CN114752592A
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱健東;蔡露漪;蘭莎莎;壽貝乙;夏宇航;葉瀚辰;米紫璇;陳虹宇;潘蕾蕾;丁佳妍;蔡妙珍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江師范大學(xué)
• 主分類號: C12N15/01
• 分類號: C12N15/01;C12N13/00;C12N1/14;A23K10/37;A23K10/12;A23K20/163
• 代理公司: 杭州知學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 33356
• 代理人: 何紅信

1.一種用于菌糠飼料化的菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)獲取白腐真菌并對白腐真菌進(jìn)行紫外微波復(fù)合誘變：

(11)制備1×10⁶個(gè)/mL白腐真菌的單孢子懸浮液；

(12)按照每81cm²設(shè)置10mL單孢子懸浮液，將懸浮液至于平皿內(nèi)，并在紫外燈下照射8min；

(13)篩選培養(yǎng)后，取重新培養(yǎng)長出的孢子，制成1x10⁶個(gè)/mL單孢子懸浮液，置于20mL的厭氧管中且每個(gè)厭氧管配置單孢子懸浮液5mL，用600W微波輻射2-3min，得到誘變后的白腐真菌菌株；

(2)在培養(yǎng)基上接種誘變后的白腐真菌，并在28℃培養(yǎng)3d后接種黑曲霉菌；共同培養(yǎng)10d后與細(xì)麩皮按照1:1的質(zhì)量比例混合，34℃恒溫烘干至水分低于10.4％，裝袋保存；所述白腐真菌和黑曲霉菌接種時(shí)的質(zhì)量比例為1:1。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于菌糠飼料化的菌劑的制備方法，其特征在于：所述培養(yǎng)基由1000體積份的馬鈴薯提取液、20質(zhì)量份的葡萄糖、15質(zhì)量份的瓊脂和1000體積份的純水配置而成；并將配置好的培養(yǎng)基采用121℃滅菌30min；所述1體積份：1質(zhì)量份＝1ml：1g。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于菌糠飼料化的菌劑的制備方法，其特征在于：所述馬鈴薯提取液制備方法為：

向200質(zhì)量份的去皮且切成小塊的馬鈴薯加入1000體積份的水，煮沸30min后，濾去馬鈴薯塊獲得；并向?yàn)V液中加水補(bǔ)足至1000體積份；所述1體積份：1質(zhì)量份＝1ml：1g。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于菌糠飼料化的菌劑的制備方法，其特征在于：所述白腐真菌的獲取方法包括：

(1)前期準(zhǔn)備：

(11)采集帶有白腐真菌菌點(diǎn)的樹皮和腐敗的樹枝作為子實(shí)體；

(12)制備PDA培養(yǎng)基，在高壓滅菌鍋中121℃條件下對PDA培養(yǎng)基、玻璃培養(yǎng)皿和鑷子滅菌30min；將滅菌后的PDA培養(yǎng)基、玻璃培養(yǎng)皿和鑷子放到工作臺(tái)中并在紫外燈下照射冷卻；在酒精燈火焰旁將冷卻的PDA培養(yǎng)基倒平板，放置待PDA培養(yǎng)基凝固，得到PDA平板；

(2)篩選：

(21)將切成小塊且?guī)в邪赘婢N的子實(shí)體用超純水沖洗3次并用無菌濾紙擦干，置于超凈工作臺(tái)中；用鑷子將小塊的子實(shí)體接種到PDA平板中，并將接種后的PDA平板放到28℃的生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6-8d直到平板中長滿菌絲；

(22)將PDA平板中的白色絲狀菌體轉(zhuǎn)接到MEA平板中，并在28℃的生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)6-8d直到MEA平板中長滿菌絲；將MEA平板上的長滿的菌絲轉(zhuǎn)移到新的MEA平板上，并重復(fù)將MEA平板上的長滿的菌絲轉(zhuǎn)移到新的MEA平板上的步驟，直到MEA平板中的菌絲為純白色作為最終獲取的白腐真菌。

5.一種用于菌糠飼料化的菌劑，其特征在于：由權(quán)利要求1至4任一所述的一種用于菌糠飼料化的菌劑的制備方法制備而成。

6.一種菌糠飼料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

將2.5質(zhì)量份的菌劑、12.5質(zhì)量份的紅糖、2500質(zhì)量份的水混合后密封放置8小時(shí)，制成菌液；所述菌劑由權(quán)利要求1至5任一所述的一種用于菌糠飼料化的菌劑的制備方法制備而成；

在容積為110000體積份的圓柱狀容器中加入菌液和500000質(zhì)量份的菌糠，翻攪均勻；發(fā)酵過程持續(xù)向容器中鼓風(fēng)，通風(fēng)量為1立方米/小時(shí)；在18～20℃，50～60％濕度環(huán)境下發(fā)酵7天；所述1體積份：1質(zhì)量份＝1ml：1g。

7.一種菌糠飼料，其特征在于，由權(quán)利要求6所述的一種菌糠飼料的制備方法制備而成。